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            • 1. 某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起.请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤,并回答有关问题:
              (1)主要步骤:
              ①制备两种培养基:一种是    培养基,另一种    的培养基.分别分成两份,依次标上A、A′和B、B′,备用.
              ②分别向A、B培养基中接种    
              ③接种后,放在恒温箱中培养3~4天.
              ④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种,接种到A′、B′培养基中.
              ⑤接种后,把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3~4天.
              (2)回答问题:
              第④⑤两个步骤的目的是    
              在步骤①中,为保证无杂菌污染,实验中应采用的主要措施有            
            • 2. 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差.科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母.请分析回答下列问题:
              (1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是:    
              (2)取从自然界中采集的葡萄,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养.

              图乙是经过图甲过程A 纯化培养的结果,在培养基上接种时划线的顺序依次是    (用编号表示).研究者在图甲过程C 的操作培养过程中,得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板,推测接种时可能的操作失误是    

              (3)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以     为碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌不能利用木糖发酵.
              (4)从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA,利用PCR 技术大量扩增获得目的基因.若将1个目的基因分子复制10 次,则需要在缓冲液中至少加入    个引物.将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上,然后将所得的重组质粒导入酵母菌时,应选择缺乏     能力的酿酒酵母作为受体菌.
              (5)将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含    的培养基中进行酒精发酵能力测试.随着发酵的持续进行,若该酿酒酵母能够存活,说明它能    ,即说明所需菌株培育成功.
            • 3. 关于制备MS固体培养基的过程,正确的是(  )
              A.将花药培养成单倍体幼苗的过程中无需添加有机碳源
              B.配制母液时,无机物中大量元素浓缩100倍,微量元素浓缩10倍
              C.在使用提前配制的母液时,可直接用移液管从母液中获取
              D.培养基中细胞分裂素和生长素比值高时可促进芽的分化
            • 4. 废纸主要成分是木质纤维.左下图是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程.回答下列问题.

              (1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在    的环境中.②中获得的酶是    酶.
              (2)若从土壤中分离出上述微生物,应以    为唯一碳源的培养基进行培养,并加入    形成红色复合物进行筛选,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的    
              (3)接种后一个平板经培养后的菌落分布如图所示,推测接种时可能的操作失误是    .向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是    
              (4)生产中可以满足④环节的常见菌种是    .玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供    .从玉米胚芽中提取的胚芽油不易挥发,宜选用    法从玉米胚芽中提取.
            • 5. 分析有关微生物的资料,回答问题.
              高温淀粉酶被大规模用于工业生产.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示.

              (1)与大肠杆菌相比,嗜热菌    
              A.对青霉素敏感,但对四环素不敏感     
              B.与真核生物的亲缘关系更远
              C.细胞的DNA中,碱基G和C含量较高,较稳定
              D.没有菌毛和质粒
              (2)进行过程①的目的是    ;过程②所使用的方法是    法.图1中弧线箭头上“?”的操作是    
              (3)Ⅰ号培养基应以    作为唯一碳源.
              (4)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是    ;一般对配制的培养液采用    法灭菌.
              (5)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放    分解培养基中的碳源,在菌落周围形成透明圈;应挑选出透明圈    (大/小)的菌落,接种到Ⅱ号培养基.
              (6)若现在发现了一种新的单细胞生物,并欲对其进行分类,下列选项不能作为分类依据的是    .(多选)
              A.核膜的有无B.核糖体的有无C.细胞壁的有无D.膜上磷脂的有无.
            • 6. (2016•洛阳模拟)(1)如图是利用    法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面.
              (2)分析下面培养基的配方:NaN03、KH2P04、NaH2P04、MgS04•7H20、KC1、H20.若此培养基用于筛选分解尿素的细菌,则应除去上述    成分,并加入    和葡萄糖,以补充    源.
              (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和    ,以提高萃取效率.鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时,通常可采用    法,在鉴定过程中需要用    作为对照.
              (4)橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解,使用水中蒸馏法又会产生    问题,所以一般采用压榨法.
            • 7. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理.现有1L土壤浸出液,用无菌吸管吸取1mL样液至盛有9mL无菌水的试管中,依次稀释103稀释度.各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为    
              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的成分特点是    
              (3)接种技术的核心是    ,是研究和应用微生物的前提.在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步    ,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (4)在培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是    ,有透明带菌落利用的氮源主要是    ,据此可筛选出目的菌.实验结果如图2显示的A~E五种菌株中,    是最理想菌株.
              (5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B,然后对突变株A和B进行实验,结果如表所示:
              接种的菌种一般培养基实验处理及结果
              A不生长添加营养物质甲,能生长
              B不生长添加营养物质乙,能生长
              A+B能生长不添加营养物质甲、乙就能生长
              突变株A不能在一般培养基上生长的原因是    .突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是    
            • 8. 玉米(2N=20)是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油等产品.下图甲表示玉米深加工过程,图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式,请回答以下问题:

              (1)玉米秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡糖糖才能供给酵母菌利用,纤维素酶是由3种组分组成的复合酶,其中的    可将纤维二糖分解成葡萄糖.纤维素分解菌能合成纤维素酶,人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌.分离纤维素分解菌常用的方法是    ;其实验流程是:土壤取样→选择培养→    →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落.
              (2)使用选择培养基从土壤中分离纤维素分解菌,对培养基的要求是    .如果还要对土壤中该类微生物进行计数,则接种方法是    
              (3)玉米胚芽油不易挥发,宜选用压榨法或    法从玉米胚芽中提取.
              (4)在育种过程中,若改变图乙过程所使用的培养基中的    ,则可能不会形成愈伤组织,而是形成胚状体.若愈伤组织没有形成根,但分化了芽,其原因可能是    
            • 9. 在微生物的实验室培养过程中,获得纯净培养物的关键是(  )
              A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
              B.接种纯种细菌
              C.适宜条件下培养
              D.防止外来杂菌的入侵
            • 10. 有机化工原料氯苯不易降解,会污染环境,现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物.回答下列问题:
              (1)为了获得能降解氯苯的微生物菌种,可在被氯苯污染的土壤中取样,并应选用以    为碳源的培养液进行选择培养.除含有碳源外,培养液还应含有    、无机盐和蒸馏水等.
              (2)将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1L含20mg氯苯的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时,则应选择微生物    作为菌种进行后续培养.
              (3)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可用    直接计数,也可选用    法统计活菌数目,一般前者得到的结果    (填“>”、“=”或“<”)后者.
              (4)对选定的菌种进行细胞学检测,发现它没有具膜细胞器如线粒体等,则该菌种属于    生物,其产生的降解氯苯的酶蛋白是在    上合成.
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