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GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究.请回答:
(1)完成图中A过程必需的工具是
;该基因治疗的受体细胞为
.
(2)若要构建含GDNF基因的表达载体,则需选择图21中的
限制酶进行酶切.
(3)限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是﹣C↓AATTG﹣和﹣G↓AATTC﹣.如图2表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因.适于作为图示GDNF基因运载体的是
.
(4)下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述,错误的是
(多选).
A.限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列
B.限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同
C.使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
D.质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
(5)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为
个,反向连接的重组载体产生片段有
(多选).
1100bp ②200bp ③600bp ④700bp ⑤6000bp ⑥6500bp.
【考点】
基因工程的原理及技术
【分析】
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【解答】
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难度:中等
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