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  • 嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:


    Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶


    (1)PCR扩增BglB基因时,选用        杆菌基因组DNA作模板。

    (2)右图为质粒限制酶酶切图谱。BglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的BglB基因重组进该质粒,扩增的BglB基因两端需分别引入          和          不同限制酶的识别序列。

    (3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为                                                              

    Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

    (4)据图1、2可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会        ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在         (单选)。

    A.50℃    B.60℃     C.70℃     D.80℃

    Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

    在PCR扩增BglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

    (5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中              (多选)。

    A.仅针对BglB基因进行诱变    B.BglB基因产生了定向突变

    C.BglB基因可快速累积突变     D.BglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

    【考点】酶的特性及应用,诱变育种,基因工程的操作程序
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    难度:较易
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