螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：

\(\fbox{配制培养基}\)→\(\fbox{灭菌、倒平板}\)→\(\fbox{X}\)→\(\fbox{培养}\)→\(\fbox{观察}\)

(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现          色环带。

(2)步骤X表示          。纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即          和          。接种时所用的接种环通过          灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从          开始划线。

   (3)在培养时，需将培养皿倒置并放在          中。

(4)临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的____________分解为NH₃和¹⁴CO₂。

【考点】培养基与无菌技术，微生物的培养，微生物的分离，土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

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