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  • 嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
    Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
    (1)PCR扩增bglB基因时,选用 ______ 基因组DNA作模板.
    (2)图1为质粒限制酶酶切图谱.bglB基因不含图中限制酶识别序列.为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入 ______ ______ 不同限制酶的识别序列.
    (3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为 ______
    Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

    (4)据图2、3可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会 ______ ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在 ______ (单选).
    A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
    Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
    在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率.经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因.
    (5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中 ______ (多选).
    A.仅针对bglB基因进行诱变     B.bglB基因产生了定向突变
    C.bglB基因可快速累积突变    D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变.
    【考点】基因工程的操作程序,酶的制备和活力的测定,PCR技术
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    难度:较易
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