定点突变技术是指通过聚合酶链式反应（PCR）向目的基因片段中引入所需变化．GFP（绿色荧光蛋白）的发光基团是第65至67位的三个氨基酸（丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸），该发光基团可利用定点突变技术使第66位酪氨酸换成组氨酸，即可发出更明亮的蓝光，成为蓝色荧光蛋白．
（1）定点突变第一步得把突变位点设计在引物上，据图1中信息人工合成短DNA引物应包含的序列是
______
，突变位点一般设计在引物中间位置的理由是
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，该定点突变技术是否成功的标志是
______
，该技术属于
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工程的范畴．
（2）如下所示，如果要用PCR扩增以下DNA模板中的基因1（左），一位同学设计了一对引物如下（右），该设计不合理的理由是
______
．
5′------基因1------3′引物1 5′--AGATCT---3′
3′------基因1------5′引物2 5′--TCTAGA---3′
（3）如图2表示引物修正后PCR扩增目的基因（基因1）的第
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轮循环的示意图．若再进行一轮循环，仅有基因1（含引物）的DNA片段有
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个．
