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  • 抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白,临床上主要用于血液性疾病的治疗。凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。下列是生产这两种酶的相关思路,请回答下列问题:

    (1)图1为通过培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。

    ①图中过程a指的是利用________法将目的基因导入受精卵,受体细胞不选用体细胞的理由是________________。

    (2)从牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力强而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。

    ①从牛胃细胞中提取目的基因。以此DNA为模板进行PCR扩增,还需要____________、____________、____________等。

    ②为提高重组DNA分子的比例,在构建重组DNA分子(如图2所示)时最好选用______________作限制酶。

    ③经研究发现,如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸,则其催化能力将提高2倍。现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶,请写出有关制备步骤:________________________。

    【考点】PCR技术,基因工程的操作程序,蛋白质工程
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