S多肽是构成乙肝病毒的主要成分，现利用基因工程制造乙肝疫苗．回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增S基因前，需根据S基因的核苷酸序列设计
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种引物，进行PCR时需加热至90～95℃然后冷却至55～60℃，此操作的目的是
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．
（2）将S基因插入Ti质粒中（如图所示）构建基因表达载体时，需要在S基因前后两端分别引入
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的酶切位点，目的是
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（答出一点即可）．
（3）用分子杂交技术检测S基因是否转录出mRNA的具体操作过程是
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，若
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，则表明转录出了mRNA．
（4）乙肝疫苗的接种需要在一定时期内间隔注射3次，其目的是使机体产生更多的
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．
