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  • 如图表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

    (1)图左DNA分子中的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由 ______ (化学键)连接.
    (2)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为 ______
    (3)为了提高试验成功率,需要通过 ______ 技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,引物的作用是 ______ ,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有 ______ 个.
    (4)若将图右中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是 ______ .经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最有可能的原因是 ______
    (5)导入目的基因的植物细胞,经过植物组织培养技术得到幼苗,该技术利用的原理是 ______
    【考点】基因工程的操作程序
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    难度:较易
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