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  • 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1和图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:

    限制酶

    BamH Ⅰ

    Hind

    EcoR Ⅰ

    Sma

    识别序列及切割位点

    GGATCC

    CCTAGG

        ↑

    AAGCTT

    TTCGAA

        ↑

    GAATTC

    CTTAAG

        ↑

    CCCGGG

    GGGCCC


                                     图1                                                     图2

    (1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有________个游离的磷酸基团。

    (2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越________。

    (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是____________________________________________________________________。

    (4)与只使用EcoR Ⅰ相比较,使用BamH Ⅰ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_____________________________。

    (5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入___________酶。

    (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________________。

    (7)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过_____   ___和________________,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质。

    (8)将重组DNA分子导入植物受体细胞的常用方法为               法。 为了确定转基因是否培育成功,要用放射性同位素标记的                         作探针进行分子杂交检测。

    【考点】基因工程的原理,基因工程的操作程序,蛋白质工程
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