科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图1:
(1)步骤①的技术名称是
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(2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有
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(3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的
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.由于DNA复制时,子链只能由5′向3′方向延伸,故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2A、B、C、D四种单链DNA片段中选取
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作为引物.对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶的组合为
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或
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(4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发
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色荧光的细胞进行体外诱导.为检测干扰素基因是否表达,可以采用
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的方法.