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  • 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。如图所示为操作流程,请回答下列问题:

    (1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的 ______ ,及时对培养基进行分装,并进行 ______ 灭菌。
    (2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约 ______ (在25℃、50℃或80℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。
    (3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有 ______ 。
    a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
    b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
    c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
    d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
    (4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和 ______ 供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上 ______ 色细胞的个数应不少于 ______ ,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。
    【考点】微生物的分离
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    难度:中等
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