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  • 柯斯质粒是一种人工建构的含有λ噬菌体DNA的cos位点(指互补的黏性末端结合形成的双链DNA区域)和质粒复制子(ori)的新型载体,它同时兼具两者特性,长度一般为57 kb。λ噬菌体的末端酶能识别并切割两端由cos位点包围着的噬菌体基因组长度(3852 kb)的DNA片段,凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的基因组,就可以被识别并包装成类似噬菌体感染大肠杆菌。下图1为应用柯斯质粒进行某一真核基因克隆的方案图,下图2为不同的限制酶及相应切割位点。请据图分析回答:

    图1图2

    (1) 柯斯质粒可以作为基因工程载体的理由是具备____、________和启动子、终止子等。 

    (2) 如图1所示柯斯克隆方案,宜采用________酶对真核基因进行酶切,采用_______酶对柯斯质粒进行酶切,经连接后图中____(选填“a”或“b”)将会被重新包装进入λ噬菌体;柯斯质粒作为载体可携带的真核基因长度范围为_。 

    (3) 检测是否成功实现转化的实验思路是:将新包装的类似噬菌体去感染大肠杆菌,后者能够在含______的培养基上生长即为转化成功。 

    (4) 从图中信息可知上述柯斯克隆方案存在的缺点是________________________________。 

    【考点】基因工程的原理,基因工程的操作程序
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    难度:中等
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