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  • 含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶,这两种酶对DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰,使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题:

    (1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是从_________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是____________________。(填字母A:基因组文库、B:cDNA文库、C:基因组文库和cDNA文库)。

    (2)含有某种限制酶的细胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破坏细胞自身的DNA,其原因可能有①______________;②___________。

    (3)利用PCR技术扩增目的基因的过程由高温变性(90~95℃)、低温复性(55~60℃)、适温延伸(70~75℃)三个步骤构成一个循环,为使得DNA聚合酶能够重复利用,选用的酶应在____________℃处理后仍然具备催化活性。

    (4)在PCR扩增目的基因时,为实现序列中的腺嘌呤被放射性同位素标记,反应体系中添加的原料应包括碱基已被标记的____________(填"腺嘌呤核糖核苷酸"、"dATP"或"ATP")。

    【考点】基因工程的原理,PCR技术,基因工程的操作程序
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    难度:中等
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