下图1表示含目的基因的DNA片段，图2表示质粒（巳知PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ三种限制酶切割后产生的黏性末端都不相同）。请回答下列问题：

（1）已知DNA的合成方向总是从子链的5＇端向3＇端延伸。利用PCR技术以图1中的DNA片段为模板扩增目的基因，需要的引物有_____________(从A、B、C、D四种单链DNA片段中选择）。上述过程中，经过_________次循环后会产生双链等长的目的基因片段。

（2）要保证目的基因能与图2中的质粒连接，要将（1）小题中选出的两种引物的5＇端分别添加上________两种限制酶的识别序列。在此基础上，对扩增的目的基因和质粒都用这两种限制酶处理，待基因表达载体构建完成后，加入到含大肠杆菌的转化液中。要从中分离出含该重组质粒的大肠杆菌单菌落，请简述操作思路_________________。

（3）从DNA分子结构分析，上述操作用到的工具酶作用的共同点是都作用于______键，但不作用于氢键。