大肠杆菌有许多菌株,野生型菌株在普通培养基中就能成活,菌株A: met^-bio^-thr⁺leu⁺thi⁺需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素,菌株B:met⁺bio⁺thr^-leu^-thi^-需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫铵。科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验。回答下列问题:

(1) 如上图所示,菌株A和B混合培养几小时后,把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上,发现长出了若干野生型菌落,对此实验现象可作出如下假设:

① 不同大肠杆菌间遗传物质发生重组。

② ____________。 

(2) 为了探究上述假设①,有人设计了一种U型管(如图),中间用过滤器隔开,大肠杆菌不能通过,但培养液和营养物质可通过,实验如下。请补充相关实验内容:

实验步骤:

① 在U型管中加入________; 

② U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时;

③ 将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在____上,观察有无菌落。 

实验结果:________。 

实验结论:菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

(3) 现有1 L水样,用无菌吸管吸取1 mL转至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释至10³倍。各取0.1 mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为31、34、37,则每升原水样中大肠杆菌数为____。该数据理论上比细菌实际数目____。 

(4) 该实验中需要灭菌的是_____________。(至少写3个) 

【考点】培养基与无菌技术,微生物的培养,纯化大肠杆菌的无菌操作和菌种保存

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