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  • 丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物,其作用机制之一是诱导细胞凋亡.以下是相关的实验研究过程及结果:
    实验材料:人肝癌细胞(HepG2),培养液,W溶液(作为溶剂),用W溶液溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液,培养瓶等.
    步骤如下:
    ①将等量的人肝癌细胞(HepG2)悬液,分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中;将培养瓶放于适宜条件下培养24h,静置、去掉上清液;
    ②_ _ _,再加入等量的培养液,于相同且适宜的条件下继续培养;
    ③培养72h,每24h 用细胞计数仪检测癌细胞数.
    请完善上述实验步骤中相关内容:
    (1)本实验的自变量是 ______ .实验验中,每组细胞培养瓶不止一个,统计后 ______ ,目的是减小误差.
    (2)设对照组癌细胞增殖率为 100%,用下面公式计算各给药组癌细胞增殖率:
    增殖率(% )=[(给药组各时段癌细胞数-给药组开始癌细胞数):(对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数)]×100.得到如表数据:
    表1  丹参酮  对HepG2细胞增殖率的影响%
    组别
     
    培养时间/h 
    24 48 72
    对照组 100 100 100
    100给药组ug/mL 0.5
    1.0
    1.5
    78
    68
    48
    62
    26
    12
    48
    21
    5
    通过数据分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是: ______ 和 ______
    (3)将培养48h的培养液离心,去除上清液后经过一系列的处理及分析,得到对照组和给药组48h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量如表所示:
    组别 G1 S G2+M 凋亡率 bax Bcl-2
    对照组 55% 36% 9% 5.6% 28% 53%
    实验组 67% 24% 9% 32.6% 37% 38%
    据此推测,丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于 ______ 期.丹参酮可能通过促进HepG2内 ______ 的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长.
    (4)顺铂(DDP)是一种DNA损伤药物,也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物.若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响,应还需设置 ______ 和 ______ 给药组才能得出结论.
    【考点】动物细胞培养,细胞的凋亡
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    难度:较易
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