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  • 某一质粒载体如图所示,外源DNA分子插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:

    (1)转基因过程必须用的工具酶有                          。质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有                           (答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。

    (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞不能区分的,其原因是二者均不含氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上都不能生长;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是_                           。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有____的固体培养基。

    (3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可作为载体,其DNA复制所需的原料来自于      

    【考点】噬菌体侵染细菌的实验,基因工程的原理和应用
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    难度:较易
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