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以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料:
A.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂--柠檬酸钠,以除去Mg,防止DNA酶的激活。
B.核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白(由核酸和蛋白质组成)的形式存在,DNA核蛋白在2mol/L的NaCl溶液中溶解度很高,但在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核蛋白易溶于0.14mol/L的NaCl溶液。
C.用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA溶液中加入2.5倍体积分数为95%的酒精,可将DNA分离出来。此时DNA十分黏稠,可用玻璃棒搅成团取出。
D.DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子,与二苯胺酸性溶液反应,生成蓝色化合物。
E.实验材料与仪器:柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14mol/L的NaCl溶液、2mol/L的NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、体积分数为95%的酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。
F.实验步骤:研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释6倍→离心处理得沉淀物→沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上层清液→提取出DNA→DNA鉴定。
(1)研磨时,取10g花椰菜,加适量的石英砂和______、______。
(2)将滤液稀释6倍,其目的是______。
(3)取沉淀物,置于2mL______溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2mL______充分振荡后静置,待其分层后,弃去上层液。该步骤的目的是除去______。
(4)如何将剩余溶液中的DNA提取出来?______。
(4)如何证明提取的物质确实是DNA?______。
【考点】
DNA的粗提取与鉴定
【分析】
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【解答】
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难度:较易
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