图是利用正常大鼠制备转基因大鼠的流程示意图，回答下列问题．
（1）质粒是环状DNA分子，没有游离端．当质粒用限制酶切割一次以后，形成
个黏性末端，若在构建基因表达载体时，选用同种限制酶来切割目的基因和质粒，再用连接酶连接两者之间的黏性末端，则会出现部分转基因大鼠中目的基因不能正确表达的情况，其最可能的原因是
．
（2）卵母细胞除从活体
中采集外，还可以从处死的雌鼠卵巢中获取，采集到的精致必须经过
处理后，才能与卵母细胞结合，完成受精作用．
（3）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是
、早期胚胎培养和胚胎移植．