转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等．图甲是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程．请据图回答下列问题：

（1）基因工程的核心步骤是    （填字母）．此过程所需的工具酶是    ．
（2）图乙是载体和反转录得到的胰岛素基因的片段，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-．GeneⅠ和GeneⅡ为质粒上的标记基因，根据图示分析，应用限制酶    切割质粒，用限制酶    切割目的基因．构建的重组质粒中，除含有外源基因、标记基因外，还必须含有    ．
（3）B过程中，常用    处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入．
（4）如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用    方法．

【考点】基因工程的原理及技术

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