纤维素分子不能进入酵母细胞．为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒．下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图1．
据图回答：
（1）本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如图2．为防止酶切片段的自身连接，可选用的限制酶组合是
或
．
A．①②B．①③C．②④D．③④
（2）设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证
不携带纤维素酶基因．
（3）纤维素酶基因的表达包括
和
过程．与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有
．
（4）在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株
不能存活，原因是
．
（5）酵母菌生成酒精的细胞部位是
，产生酒精时细胞的呼吸方式是
．在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具优势，因为导入的重组质粒含有
，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率．