Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的    （结构）．
（2）培养细胞过程中，要置于CO₂培养箱中，CO₂的主要作用是    ．
（3）用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段．为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有    酶的酶切位点．
（4）基因治疗是治疗    最有效的手段，该病很难用一般药物进行治疗．

【考点】基因工程的原理及技术,动物细胞核移植技术,胚胎移植

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