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  • 回答下列有关生物工程的问题.
    Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如图1(图中数字序号表示的是相关过程).

                              图1

                                      图2 
    (1)在核移植前应去除    的细胞核.
    (2)过程②,重组胚胎培养到一定时期时,可从其    中分离出的ES细胞的特点是    
    (3)过程③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体,具体过程如图2.图中Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因,限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同.可以根据Rag2基因的    设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选,④过程采用的酶是    ,⑤过程采用的酶是    .如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割,假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等,则形成的DNA片段有    种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占    
    (4)在ES细胞培养液中加入    可以体外诱导定向形成造血干细胞.
    (5)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的    ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
    【考点】基因工程的原理及技术,动物细胞核移植技术,胚胎移植
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    难度:较难
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