生物制剂W和X均能显著抑制癌细胞增殖，且X效果更好。欲研究联合使用两种生物制剂对癌细胞增殖作用的效果，请根据下列材料与用具，完善实验分组和实验思路，预测实验结果并进行分析。

材料与用具：肝癌细胞悬液、培养液、W溶液、X溶液、培养瓶、血细胞计数板、显微镜等。

(要求与说明：细胞计数的具体操作过程不作要求；不考虑加入W和X后的体积变化等误差；只进行原代培养且培养条件适宜；各组实验结果均有明显差异）

请回答：

（1）实验分组：

W组：肝癌细胞悬液+培养液+W溶液

X组：肝癌细胞悬液+培养液+X溶液

C组：肝癌细胞悬液+培养液+               ；

D组：             。

（2）实验思路：

（3）结果预测：下表中已填写了1种可能的结果和相应的结论，请添加若干行，并将其他可能的结果和相应结论填入表中。结果用数轴表示，各组癌细胞的数目从左往右依次增加，字母间距大小不作要求。

联合使用生物制剂W和X对肝癌细胞增殖效果实验结果预测及分析表

已知0.5mg/ml范围内的二氯二乙胺可抑制癌细胞增殖，且效果与浓度正相关。又有科研发现二氯二乙胺与药物H同时作用效果更加明显。现提供下列材料，请对上述现象进行验证。

材料：小鼠肝癌细胞、0.5mg/ml二氯二乙胺溶液、a浓度药物H溶液、蒸馏水、生理盐水、培养瓶、全营养培养液及相关培养和计数设备。

（1）完善实验思路：

①取培养瓶若干，编号1、2、3……

②分组及加样：请用表格表示，并注明添加的成分，用“+”表示添加，空格表示不添加；（注：若各组添加某一相同成分时，应注意“等量且适量”。）

③将上述培养瓶置于        环境中培养一段时间；

④从各培养瓶中取等量的培养物，用         对其进行计数。若发现压在方格上的细胞，应         ；

（2）结合所学知识，请分析：

①研究表明二氯二乙胺作用一段时间后，可使细胞停留在G₁/S临界处，则其可能干扰了一种酶的作用，这种酶是          ；

②再经药物H作用后，又发现有部分细胞中染色体数与核DNA的比值为0.5，则药物H的作用机理可能是         。

日本福岛核泄漏问题引起全世界的高度关注，核辐射会使人群中的癌症、畸变等疾病的发生率增加，影响几代人的健康。请回答：

（1）一般而言，一个正常的细胞一旦到了其寿命，它会“自杀身亡”，这种过程属于________。而核辐射会使细胞发生基因突变，导致正常细胞的_________________失控而变成癌细胞。

（2）某科研单位研制出一种新型药物X，据说对核辐射引起的恶性肿瘤有较好的疗效。某医院为验证其疗效，设计了如下的实验方案。请你补充完成下列实验方案：

a．将配制的培养液均分为两组，并标号为A、B；

b．A组加入一定量的药物x，B组不加，将_________________肿瘤细胞置于两组培养液中；

c．两组放在相同适宜的条件下培养一段时间，显微观察并记录______________________。

结果预测及结论：_____________________________________________________________________________。

苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得,为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用,学者做了大量研究,相关实验过程及结果如下:

① 取小鼠肝癌Hepal-6细胞;

② 制成单细胞悬液,等量接种于多孔板,加入等量细胞培养液,每组设5个平行孔;

③ 于37℃、5%CO₂培养箱中培养24 h;

④ 加入等量不同浓度的SW溶液,于37℃、5%CO₂培养箱中培养;

⑤ 分别在24 h、48 h、72 h时摇匀后吸取培养液,观察并记录结果,得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线,如图所示;

⑥ 将培养48h的培养液离心,细胞染色,在荧光显微镜下观察拍照,记录癌细胞和凋亡细胞的数目,并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况,汇总统计结果见下表。

培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达水平

注:“+”的数量表示相对值的大小。

请回答下列问题:

(1) 实验中进行小鼠肝癌Hepal-6细胞培养的原理是____。培养箱中要有适量的无菌空气,原因是______________。肝癌细胞数量增多扩展时,细胞能相互重叠向三维空间发展,形成堆积物,可能的原因是________。 

(2) 实验步骤③中“于37℃、5%CO₂培养箱中培养24h”的目的是____________。 

(3) 分析图中曲线可知,SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是____________________________________________。 

(4) 表中结果表明SW可以诱发细胞____,从而抑制肿瘤细胞生长。从两种蛋白质的表达水平来看,Bax蛋白和Bcl-2蛋白对癌细胞凋亡的作用分别是________。 

杂志7月18日刊登了北大生命科学院教授邓宏魁团队的研究成果——使用4个小分子化合物的组合，把成年鼠的体细胞逆转为“多潜能性干细胞”。它为未来应用再生医学治疗重大疾病带来了新的可能，但是这种诱导是否会引发肿瘤或其他安全性问题还没有解决。请回答下列问题：

（1）该团队利用这种干细胞培育出多只健康的小鼠。

 ①干细胞分化过程中，随着细胞体积增大，其_________________减小，从而限制细胞的长大。

 ②干细胞分化产生的各种体细胞核遗传信息相同的原理是______________。

（2）如果4个小分子化合物是核糖核苷酸。采用³²P对尿嘧啶核糖核苷酸进行标记，可检测到放射性的具膜细胞器为______________，观察该细胞器可以使用___________________染色。

（3）如果这种诱导引发肿瘤，与正常体细胞相比，癌细胞具有的特征包括_________（多选）。

A.细胞膜上的糖蛋白减少          B.细胞膜上的甲胎蛋白(AFP)减少

C.含有的基因组与体细胞相同        

D.细胞生长、分裂迅速

（4）研究发现，青蒿素能抗癌，并有可能彻底改变癌症的方法。研究人员从青蒿中提取出青蒿素，加入细胞培养液中培养人乳腺癌细胞，检测青蒿素对细胞增殖的影响。青蒿素浓度和实验结果如图所示。

此实验中还有一组对照实验，其处理是__________。如图结果说明青蒿素能____________,且青蒿素作用的效果受__________的影响。

肺癌是常见的恶性肿瘤之一，请你回答相关问题。

（1）资料表明，长期吸烟者肺癌的发病率比不吸烟者高4～10倍，这是因为香烟中含有          致癌因子，容易引起肺部细胞的原癌基因和抑癌基因发生突变，导致                 变短和失控，细胞无限增殖形成肿瘤。

（2）用患肺癌小鼠的睾丸组织切片来观察细胞的分裂，需用             进行染色，才能看到染色体。

（3）研究人员合成一种治疗肺癌的化合物A，为了验证它的效果，研究小组通过基因改造得到只患肺癌的实验鼠若干，实验分组和结果如下：

  ①该实验的自变量是                ；要直观和定量地反映治癌效果，可以定期观测                                       。

  ②B组的实验动物是                                            。

 ③为什么每组的实验动物不是1只而是30只？

                                                                         。

某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题：

(1)若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24小时后取一滴稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”是等量的)观察，发现有64个肿瘤细胞，则此肿瘤细胞的细胞周期约为________小时。

(2)化疗是抑制癌细胞增殖的一种方法，其原理是用药物抑制癌细胞的________，使细胞分裂停止在分裂间期。

(3)某科研单位研制出一种新型药物X，请设计实验：探究新型药物X对抑制癌细胞的增殖是否有疗效，并预测可能的实验结果，得出相应的结论。

实验材料：锥形瓶两个、显微镜、载玻片、盖玻片、培养箱、培养液、新型药物X、生理盐水、肿瘤细胞等。

实验步骤：

①取两个消毒后的洁净锥形瓶，标号A、B。

②a.分别在两个锥形瓶中加入______________。

b．在A中加__________，B中加______________________________。

c．____________________________________________________________。

d．制成装片在显微镜下观察______________________________________。

③可能的实验结果与相应的结论：

a．__________________________________________________________。

b．___________________________________________________________。

c．___________________________________________________________。

近期统计数据显示,癌症已成为我国城市居民的首要死因。请回答问题。

(1)体外分别培养某种癌细胞和正常体细胞,上图中代表癌细胞生长曲线的是             。在体内,癌细胞可能侵袭周围正常组织,说明癌细胞具有                 的特性。 

(2)端粒酶是与染色体末端结构相关的一种细胞组分。表中数据显示细胞癌变可能与端粒酶的活性有关,请完成下面的探究实验。

实验目的:研究端粒酶与细胞癌变的关系。

实验材料:癌细胞,端粒酶抑制剂,细胞培养液等。

实验步骤:

①                                                                                                         ; 

②                                                                                                         ; 

③                                                                                                          。 

结果预测及分析:若                     ,说明端粒酶的活性与细胞癌变有关;若 ,说明端粒酶的活性与细胞癌变无关。 

(3)请根据上述内容,提出一种治疗癌症的新思路:                                                      。 

细胞培养已经成为生物化学、医学、制药等领域研究和生产不可缺少的技术。回答下列有关动物细胞培养的问题。

(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_________。

(2)在动物细胞培养过程中，首先要保证无菌、无毒的环境，对培养液要进行无菌处理外，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________，作用是__________________。动物细胞培养还需要的其他条件是___________、____________、____________。

(3)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现____________________的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面的糖蛋白的量________。

(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。

请回答与实验有关的问题：

   某同学从资料获知，二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，并设计了如下实验加以验证，请根据实验方案回答问题。

   实验材料：二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，细胞培养液（内有小鼠肝部肿瘤细胞），试管等。

   实验的主要步骤如下表所示：

结论：第一，                                                ；

     第二，                                                。