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            • 1． 已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
              （1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用 ______ 染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 ______ （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
              （2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 ______ 为碳源的固体培养基进行培养．从功能上划分该培养基属于 ______ 培养基
              （3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 ______ 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 ______ 法进行计数．
              （4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ______ ℃条件下该酶活力最小．为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ______ ℃设计后续实验．
              难度：较易
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            • 2． 谷物中淀粉酶活性是影响啤酒发酵产酒的重要因素．某科研小组为寻找啤酒发酵的优良原料，比较了小麦、谷子、绿豆萌发前后淀粉酶活性，其实验过程及结果如下．分析回答：
              ①谷物的萌发：称取等量小麦、谷子、绿豆三种谷物的干种子，都均分为两份，其中一份浸泡2.5h，放入25℃恒温培养箱，至长出芽体为止．
              ②酶提取液的制备：将三种谷物的干种子和萌发种子分别里于研钵中，加入石英砂和等量蒸馏水研磨、离心，制备酶提取液．
              ③反应进程的控制：分别取②制备的酶提取液1mL置于不同的试管中，加入lmL1%的淀粉溶液，25℃保温5min后，立即将试管放入沸水浴中保温5min．
              ④吸光度的测定：在试管中加入 ______ 、摇匀、加热，当溶液由蓝色变为砖红色后，用分光光度计依次测定各试管的吸光度．
              ⑤酶活性的计算：将测定值与标准麦芽糖溶液吸光度比对，计算出淀粉酶活性，结果如表：
              名称 小麦 谷子 绿豆
              未萌发谷物的淀粉活性/U•g-1 0.0289 0.0094 0.0074
              萌发谷物的淀粉酶活性/U•g-1 5 1.7645 0.0395
              （1）本研究的自变量是 ______ 、 ______ ．
              （2）步骤②中加入“石英砂”的目的是 ______ ；步骤③中立即将试管在沸水浴中保温5min的作用是 ______ ．避免因吸光度测定先后对实验结果的影响：歩骤④“？”加入的试剂是 ______ ．
              （3）实验结果表明，谷物萌发过程中淀粉酶活性 ______ ，其意义是 ______ ．
              （4）本实验对生产实践的指导意义是应优先选择 ______ 作为啤酒发酵的原料．
              难度：较易
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            • 3． 回答下列有关微生物和酶工程的问题．
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．
              （1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和 ______ （用序号组合回答）．
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1．

              （2）大规模产业化首选的菌株是 ______ ；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是 ______ ．
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂．
              （3）在60～70℃保温一定时间的作用是 ______ ．
              A．诱导蛋白酶的热稳定性
              B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C．裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              （4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为 ______ （选择正确的序号并排序）．
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩．
              难度：较易
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            • 4． 下列关于酶工程的叙述正确的是（　　）
              A．需依次经过提纯、沉淀、过滤等过程
              B．酶制剂中的酶通常用化学方法人工合成
              C．酶的分离、提纯过程中要保持酶的活力
              D．酶固定化通过改变酶的空间结构提高催化效率
              难度：较难
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            • 5． 关于纤维素酶的说法正确的是（    ）
              A．纤维素酶是多种酶组成的一种复合酶
              B．每种组分都能催化纤维素分解成葡萄糖
              C．每种组分发挥作用的最适pH为碱性
              D．细菌的纤维素酶都需要内质网加工和分泌
              难度：中等
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            • 6． 1963年诺和诺德公司向洗涤剂中加入碱性蛋白酶，推出了第一款加酶洗衣粉．碱性蛋白酶一般利用枯草芽孢杆菌生产．图甲、乙为某科研小组对碱性蛋白酶相关性质进行测试的结果．图丙、丁为两种常见的平板划线法；连续划线法和四区划线法，前者适用于纯化菌种较少的样品，后者适用于纯化菌种较多的样品．请回答下列问题：

              （1）由图甲、乙可知，碱性蛋白酶发挥作用的适宜条件为 ______ ．
              （2）图丁中依次进行四区划线，四区的面积要求为C＜D＜E＜F，F区面积最大的原因是 ______ ．每次划线后都要 ______ 接种环，注意F区划线不要与 ______ （填字母）区相连．
              （3）某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图 ______ 所示的方法划线培养，分离得到的纯化单菌落属于 ______ （填“种群”或“群落”）．
              （4）碱性蛋白酶是枯草芽孢杆菌生长后期向细胞外分泌的一种酶，与该酶合成有关的细胞器是 ______ ．若欲应用固定化技术提高该酶的利用率，减少产物中的杂质，则应采用 ______ 方法．
              难度：较易
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            • 7． （8分）水稻种子中70％的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子；同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。

              （1）磷元素除了形成植酸外，还可以出现在下列______________分子或结构中(多选)。

              A. 核糖      B. ATP       C. 核糖体       D. 核膜

              （2）种植芦苇能有效抑制水华的发生，表明芦苇与引起水华的藻类关系是________。

              （3）若植酸酶是由20个氨基酸形成的肽链，其中氧原子至少有________个，若将其水解成10个二肽，则肽键将减少________个。

              （4） 植酸酶可降解植酸，在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的营养成分的利用率。酵母菌中植酸酶的活性较高。下图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程。据图回答：

              ①植酸酶____________(Ⅰ/Ⅱ)属于分泌蛋白。

              ②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽链组成不同，其差异体现在_______。

              ③提纯的植酸酶需做活性条件测定，右图为测定结果。图中的自变量可为________(答一种)；因变量可以通过测定___________来表示。

              难度：较难
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            • 8． (10分）萌发的小麦种子中的淀粉酶主要有α－淀粉酶（在pH3．6以下迅速失活，但耐热）、β－淀粉酶（不耐热，70℃条件下15min后就失活，但耐酸）。以下是以萌发的小麦种子为原料来测定α－淀粉酶催化效率的实验，请回答下列与实验相关的问题。

              [实验目的]测定40℃条件下α－淀粉酶的催化效率。

              [实验材料]萌发3天的小麦种子。

              [主要器材]麦芽糖标准溶液、5％淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅、试管等。

              [实验步骤]（1）制备不同浓度麦芽糖溶液，与斐林试剂生成标准颜色。取7支洁净试管编号，按下表中所示加入试剂，而后将试管置于60℃水浴中加热2min，取出后按编号排序。

              表中Z代表的数值是______________。

              （2）以萌发的小麦种子制取淀粉酶溶液，将装有淀粉酶溶液的试管置于____________，取出后迅速冷却，得到α－淀粉酶溶液。

              （3）取A、B、C、D四组试管分别作以下处理：

              （4）将Al和Bl试管中溶液加入到E1试管中，A2和B2溶液加入到E2试管中，A3和B3溶液加入到E3试管中．C、D试管中的溶液均加入到F试管中，立即将E1、E2、E3、F试管在40℃水浴锅中保温一段时间。然后分别加入2mL斐林试剂，并经过60℃水浴中加热2min后，观察颜色变化。

              [结果分析]将E1、E2、E3试管中的颜色与________________________试管进行比较得出麦芽糖溶液浓度，并计算出α－淀粉酶催化效率的平均值。

              [讨论]①实验中F试管所起的具体作用是排除_______________________________对实验结果的干扰，从而对结果进行校正。②若要测定β－淀粉酶的活性，则需要对步骤二进行改变，具体的操作是将淀粉酶溶液_________________________________，从而获得β－淀粉酶。

              难度：易
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            • 9． 某物质常温下能分解果肉细胞壁中的果胶，提高果汁产出量，使果汁变得清亮．下列对该物质的叙述正确的是（　　）
              A．该物质由氨基酸和核苷酸组成
              B．该物质能分解果肉细胞壁中的纤维素
              C．该物质在低温条件下会失去活性
              D．该物质在蛋白酶作用下可能会被降解
              难度：较易
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            • 10． 柑橘是重要的经济作物，经深加工可生产果汁、酒精、含胡萝卜素的食品添加剂．请回答下列相关问题：
              （1）在生产酒精的过程中，发酵温度控制在 ______ ℃．发酵过程中定期打开排气装置，目的是 ______ ．
              （2）可用 ______ 的方法提取柑橘中的胡萝卜素，将提取的胡萝卜素粗品通过 ______ 法进行签定．
              （3）柑橘加工产生大量皮渣，严重污染环境．研究发现，皮渣能被枯草杆菌分解，但发酵过程中产生的有机酸，导致pH下降，影响其分解效果．通过辐射处理枯草杆菌，筛选获得耐酸菌株 A、B．
              ①筛选菌株时，枯草杆菌生长繁殖所需要的主要营养物质有碳源、氮源、 ______ 四类，该培养基中果胶为唯一碳源，只有能将果胶分解成 ______ 的微生物才能生长．
              ②纯化菌株时，使用的涂布工具是 ______ ．取某一稀释液涂布了三个平板，其中一个平板无菌落，另外两个有菌落．造成无菌落的操作失误最可能是 ______ ．
              ③用分离得到的果胶酶进行了相关实验，结果如图．
              请据图分析：处理柑橘皮渣时，选用菌株 ______ ，理由是 ______ ．
              难度：较易
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