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            • 1． Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

              （1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的    （结构）．
              （2）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体．可以根据Rag2基因的    设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．用Hind III和Pst I限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段．为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有    酶的酶切位点．
              （3）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的    ，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．
              难度：中等
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            • 2． 请回答下列现代生物科技问题：
              （1）基因工程的工具之一限制酶主要是从    中分离纯化出来的．将目的基因导入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为    ，从分子水平检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是    ．
              （2）将目的基因导人动物细胞培育转基因动物常用的受体细胞是    ，经早期胚胎培养和    ，使其发育成具有新性状个体．
              （3）胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在功能上具有    ，在    细胞上或在添加抑制因子的培养液中培养可以增殖而不发生分化．
              （4）转基因产品的安全性问题一直是争论的焦点，原因之一是由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的    、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解的相当有限．
              难度：中等
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            • 3． 为治疗某种遗传性糖尿病，研究人员完成如图工作．

              （1）图1中①是取自患者体细胞的    ．
              （2）图1中过程②表示    技术．过程③表示    技术．
              （3）重组细胞在体外培养时，培养液中除了加入诱导物外，还应加入水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、    等必需的营养成分．
              （4）定向诱导使重组细胞B发生    ，从而形成功能专一的胰岛样细胞．为检测胰岛样细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，研究人员分别控制甲、乙两组培养液中    的浓度，将胰岛样细胞先后放在甲、乙两组培养液中，保温相同时间后检测胰岛素的分泌量．若诱导成功，则图2中甲组应为    情况下测得的胰岛素分泌量，理由是    ．
              难度：中等
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            • 4． 回答下列有关现代生物科技专题的问题：
              （1）基因工程中能连接两种末端的“分子缝合针”是    ．基因工程的核心步骤是    ．
              （2）进行植物体细胞杂交时，化学法一般是用    作为诱导剂来诱导细胞融合．用动物细胞制备的单克隆抗体最主要的优点是    ．
              （3）胚胎工程中的最后一道“工序”是    ．
              （4）囊胚时期可发育成胎儿各种组织，个体较大的细胞是    细胞，而    细胞可以用于性别鉴定，该处细胞将来会发育成    ．
              难度：中等
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            • 5． 供体细胞的抗原决定基因能编码抗原或与抗原形成的关的酶，导致器官移植过程中出现免疫排斥．科学家利用基因工程方法对猪的基因组进行改造，以解决人体移植器官的短缺和免疫排斥问题．回答下列问题：
              （1）对猪基因组进行改造，可以选择某种有调控作用的目的基因，重组后导入爱体细胞，以达到抵制猪抗原决定基因    的目的．进行DNA重组时需要使用的工具酶是    ．
              （2）选择猪胚胎干细胞作为受体细胞，胚胎干细胞是由    或    中分离出来的一类细胞．将目的基因导入后，利用标记基因的作用    含有目的基因的受体细胞．
              （3）将含有目的基因的胚胎干细胞注入猪囊胚，而后将囊胚通过    技术移入受体子宫，获得转基因猪．
              （4）采用核移植技术克隆转基因猪时，应选用处于    期的卵母细胞作为受体细胞；随后从构建的重组胚胎中分离得到胚胎干细胞，经诱导分化形成多种器官，这是利用了胚胎干细胞的    ．
              难度：中等
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            • 6． 下列有关胚胎工程的叙述正确的是（　　）
              A．胚胎干细胞具有发育的全能性，体外培养可发育成新个体
              B．培养胚胎千细胞过程中加入饲养层细胞是为了维持细胞不分化的状态
              C．进行早期胚胎体外培养时，需配制一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液
              D．通过胚胎干细胞核移植，可以培育出与细胞核供体完全相同的复制品
              难度：中等
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            • 7． 如图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答．

              （1）人类“治疗性克隆”属于生物工程中的    技术．
              （2）科学家为何不直接用体细胞进行细胞培养？    ．
              （3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有    ．相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是胰岛细胞，有的是血细胞，有的是心肌细胞，究其本质原因是基因    的结果，上述“克隆”过程是建立在胚胎干细胞的    和    的基础上的．
              （4）若将上述结果用于白血病人的骨髓移植，如图中患者是A型血，提供卵细胞的女性是AB型血的，则骨髓移植成功后患者的血型是    型．
              （5）按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是    ．
              难度：中等
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            • 8． 下列关于胚胎干细胞的叙述正确的是（　　）
              A．可以从囊胚细胞中分离
              B．不能只增殖而不分化
              C．细胞核小而核仁明显
              D．不具有发育的全能性
              难度：中等
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            • 9． 下列关于胚胎干细胞（EK或ES）的叙述，正确的是（　　）
              A．可以从囊胚的滋养层细胞或原始性腺中分离出胚胎干细胞
              B．将胚胎干细胞放在饲养层细胞上培养可促进细胞分化
              C．ES细胞在体外培养时可以只增殖不分化
              D．EK细胞体积大、细胞核小、核仁明显、具有发育的全能性
              难度：中等
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            • 10． 有关胚胎干细胞的叙述错误的是（　　）
              A．可以用于治疗由于细胞坏死，退化或功能异常引起的疾病
              B．是研究体外细胞分化的理想材料
              C．培养过程与动物细胞培养完全相同
              D．细胞体积小，细胞核大，核仁明显
              难度：中等
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