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            • 1. 请回答下面有关生物技术的相关问题:
              (1)在进行植物组织培养的过程中,除了提供水分和必要的有机营养物质外,还需要在培养基中加入 . 同时,培养过程中,除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外,还必须保证的关键条件是 .
              (2)应用基因工程、克隆等技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳汁生产血清白蛋白的过程中,首先需要构建基因表达载体,做法是将基因与 的等调控组件重组在一起,再将构建好的基因表达载体导入到 细胞中.
              (3)某养殖户把自己的养鸡场、养猪场、鱼塘和桑园也纳入某一已经构建好的生态园,并把很多单个生产系统通过优化组合有机地整合在一起,改善了系统的功能,这体现了生态工程原理.
              (4)下列有关生物技术安全性的叙述,正确的是 
              A.一旦发现转基因生物出现了安全性问题,要马上停止实验,并销毁重组生物
              B.人们对转基因食品的担心,从某些实例来看是多余的
              C.转基因生物带来的安全性问题主要包括基因安全、环境安全、生物安全
              D.由于生殖隔离,转基因农作物肯定不会将目的基因传给杂草
            • 2. 为实现目的基因与运载体结合,以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质,研究人员进行了如图所示操作.请分析回答下列问题:

              (1)图表示用BamH I切割含目的基因的 ,质粒经相同限制酶处理后,经 酶的作用获得a,a称作 .将a与感受态大肠杆菌混合后,混合物应接种在含有的培养基上.质粒中抗氨苄青霉素基因称为 ,在筛选过程起作用.若要证明培养基是否符合实验要求,培养基上需接种 的感受态大肠杆菌,培养后不出现菌落则培养基合格.
              (2)DNA分子中,一条链中的两个核苷酸通过 相连,已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸,构建a的过程中用该酶处理质粒,但目的基因不用碱性磷酸酶处理,这样做的目的是 . 如果要检测目的基因 是否成功表达,须提取培养后大肠杆菌的 , 用相应抗体检测.
            • 3. 利用生物工程技术,可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV,用于血友病的治疗.请回答下列问题:
              (1)根据凝血因子IV基因上游和下游的碱基序列,可用 技术获取并扩增基因.构建该基因表达载体时,所用到的工具酶是 ,该基因表达载体中,凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别是 .
              (2)将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是 .受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和 
              (3)在体外胚胎培养时,应选用囊胚的 进行DNA分析,用于选择雌性胚胎.此期的胚胎也适于胚胎分割移植,此技术的优点是 
              (4)人凝血因子IV是一种胞外酶,该蛋白的加工是在 等细胞器上进行的.人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是 .
            • 4. 利用生物工程技术,可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV,用于血友病的治疗.请回答下列问题:
              (1)根据凝血因子IV基因上游和下游的碱基序列,可用 技术获取并扩增基因.构建该基因表达载体时,所用到的工具酶是 ,该基因表达载体中,凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别是
              (2)将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是 . 受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和 
              (3)在体外胚胎培养时,应选用囊胚的 进行DNA分析,用于选择雌性胚胎.此期的胚胎也适于胚胎分割移植,此技术的优点是 
              (4)人凝血因子IV是一种胞外酶,该蛋白的加工是在 等细胞器上进行的.人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是 .
            • 5. 青蒿素是从植物黄花蒿茎叶中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物,控制疟疾挽救了数百万人的生命.为了获取更多的青蒿素,科学家采用多种方法.
              方法一:利用雌雄同株的野生型青蒿(二倍体,体细胞染色体数18条),通过传统的育种和现代生物技术培育高青蒿素含量的植株.
              方法二:科学家用基因工程技术,利用酵母菌细胞合成靑蒿素(如图所示).
              (1)若利用植物组织培养技术进行青蒿素的工厂化生产,可将青蒿素细胞经培养获得的 细胞置于发酵罐中培养,经方式实现细胞数目的增多并产生大量的青蒿素.
              (2)根据图示代谢过程,科学家在培育能产生青蒿素的酵母菌细胞过程中,需要向酵母细胞中导入 ,继而可利用  技术检测目的基因是否导入受体细胞.
              (3)图中①②过程无论发生在青蒿素细胞中,还是发生在酵母细胞中,都能产生相同的物质FPP,原因是 、 . (写出2点)
              (4)实验发现,酵母细跑导入相关基因后,该基因能正常表达,但酵母菌合成的青蒿素仍很少,根据图解分析原因可能是 
            • 6. 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.
              (1)以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全,其原因是 .
              (2)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的 细胞与鼠的瘤细胞进行杂交,获得纯净的单一品种抗体,其特点是 ,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击埃博拉病毒(EBO).
              (3)科研人员将GP蛋白基因通过 (方法)导入牛受精卵中,可以通过 技术从分子水平检测转基因是否培育成功.体内受精作用进行时防止多精入卵的机制有 和
              (4)为了从分泌乳汁中生产GP蛋白,在基因导入受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的 .早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前,必须对胚胎进行性别鉴定,一般是取处于 时期的细胞进行检测.
            • 7. 如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHI、HindIII、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点.据图回答:

              (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因.筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行.能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的 .过程①采用的操作方法通常是 .
              (2)过程②代表的生物技术是 .对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体.目前最常见的是经分割产生的同卵 胎.
              (3)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用 技术.
              (4)对代孕牛的要求是
            • 8. 内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系.内皮素(ET)主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应.科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaI的识别序列为 , 限制酶XhoI的识别序列为      . 请据图分析回答:

              (1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和 酶等.完成过程①②③的目的是 .
              (2)过程③和⑤中,限制酶XhoI切割DNA,使 键断开,形成的黏性末端是 .用两种限制酶切割•获得不同的黏性末端,其主要目的是 
              (3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是 的部位,进而可驱动基因的转录.除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是 
              (4)过程⑥要CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的 细胞.
              (5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测 
              (6)基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中,不仅能有效改良植物的品质.还由于叶绿体转基因不会随(“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物.
            • 9. 回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题:

              (1)培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体,其目的是使目的基因在受体细胞中 ,并且可以通过复制遗传给下一代,同时,使目的基因表达和发挥作用.
              (2)构建基因表达载体时,可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的 键.
              (3)组成基因表达载体的单体是 .基因表达载体中的启动子是 识别和结合的部位,这种结合完成后才能驱动目的基因通过 (填过程)合成mRNA.
              (4)用两种限制酶XbaI和SacI(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,获得含目的基因的片段.若利用该片段构建基因表达载体,应选用下图中的何种Ti质粒? 
              (5)将受体细胞培养成植株需要应用 技术,该技术的理论依据是 .
            • 10. 回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题:

              (1)培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体,其目的是使目的基因在受体细胞中 ,并且可以通过复制遗传给下一代,同时,使目的基因表达和发挥作用.
              (2)构建基因表达载体时,可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的 键.
              (3)组成基因表达载体的单体是 .基因表达载体中的启动子是 识别和结合的部位,这种结合完成后才能驱动目的基因通过 (填过程)合成mRNA.
              (4)用两种限制酶XbaI和SacI(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,获得含目的基因的片段.若利用该片段构建基因表达载体,应选用下图中的何种Ti质粒?
              (5)将受体细胞培养成植株需要应用 技术,该技术的理论依据是 .
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