[生物——选修1：生物技术实践]

谷氨酸钠是味精的主要成分，工业生产中常用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸。下表是生物兴趣小组探究发酵条件对微生物数量和产物生产的影响。

请分析回答下列问题：

（1）谷氨酸棒状杆菌发酵的培养基中主要营养物质有________，该培养基是一种________培养基。

（2）得到谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法是________，用该方法计数过程：取第二组的100倍的稀释液0.1ml滴加到计数板（由25×16＝400个小室组成，容纳液体总体积为0.1mm³）上；记录到5个中方格（80个小室）共有菌体48个，则1ml的第二组发酵液中有菌体________个。用该方法测定的微生物数量大于实际的活菌数，原因是________。

（3）由上述探究可知，要通过发酵得到大量谷氨酸需首先不断向发酵液中通入________，将碳氮比设为________培养一段时间，然后将发酵液中碳氮比改为________继续培养。

［生物——选修1：生物技术实践］据生物技术相关知识回答：

⑴灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括            。以下操作属于灭菌的有        （选代号，不定项），属于消毒的有      （选代号，不定项）。

①用70%的酒精擦拭双手          ②用适宜浓度的氯气处理水源

③将牛奶在70—75℃下煮30分钟  ④将沾有少量酒精的涂布器末端在火焰上引燃

⑤将试管口、接种环通过酒精灯充分燃烧层

⑥将平板倒置（皿盖在下、皿底在上）放入培养箱

⑵若要测定某培养液中的活菌数，既可经染色后在显微镜下用           直接计数，也可不染色直接选用                 法统计活菌数目，一般前者得到的结果           （填“大于”、“等于”、“小于”）后者。

⑶用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是                  。

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

某同学利用自己所学的生物技术自制酸奶，实验方案如下：

材料用具：纯牛奶、原味酸奶；带盖瓶子、勺子、可调温电饭锅。

制作方法：

（1）将瓶子（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加水煮沸10分钟。

（2）瓶子稍冷却后，向瓶子中倒入牛奶，再放入电饭锅中沸水浴加热10分钟。

（3）待牛奶冷却至40℃左右（不烫手）时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”，用勺子搅拌均匀，拧紧瓶盖。

（4）将电饭锅温度调至40℃，继续保温 7-8小时。

请回答：

（1）将瓶子等煮沸的目的是________________________________________。

（2）“引子”指的是酸奶中的___________，其属于__________（填“真核”或“原核”）生物。与该菌种比较，醋酸菌的代谢特点不同是____________________。

（3）牛奶冷却后才能导入“引子”的原因是________________________，将瓶盖拧紧是为了保持____________条件。

（4）适量饮用酸奶有利于改善腹胀、消化不良等症状，其原理是酸奶中的微生物能分解消化道中的部分食物且________________________________。

（5）另一名同学在重复相同实验时，为避免杂菌污染向牛奶中加入了青霉素，结果发酵失败，原因是__________________________________。

(1)大肠杆菌的同化类型为________，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________。

(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是________，因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使________，还能破坏DNA的结构。

(3)根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中________换成________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红·美蓝换成________。

(4)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是________和________。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为________。

(5)使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(多选)。

A．制作果酒    B．由果酒制作果醋    C．制作泡菜    D．制作腐乳

（1）酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是___________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_____________。

（2）实验室可采用__________法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，还需要额外在培养基中添加_________________。

（3）为了保持所获得的菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，需将菌种接种在___________上。放入4℃冰箱中可保藏3-6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的_______ ___混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

（4）在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学认为是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持_______的观点，理由是______________。

酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答： 

（1）酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物                      。 

（2）实验室可采用                           法进行菌种纯化，所用培养基需经_________________法进行灭菌。 

（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏，也可以利用____________的方法长期保存。

（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持            ，(1分)理由是                     。 

（1）像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有                     等。(要求回答4种营养物质)

（2）当酵母繁殖时，没有糖转化为酒精，此时酵母菌为                 呼吸．

（3）从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌，最简单的培养方法是：在              并且                条件下进行培养．

（4）葡萄酒制作是否成功，发酵后需用             来鉴定，在             条件下，该物质与酒精反应呈现            色。

（5）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用                   培养基，常用的接种方法                和                 ．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为               个/mL．该统计结果             （低于、高于）实际值。

（1）与酵母菌相比，乳酸菌结构上的主要特点是   ▲   。

（2）目前已知的乳酸菌大约有200多种，如果要对其纯化并计数可采取的方法是   ▲   。

（3）与鲜奶相比，等量酸奶中的有机物种类   ▲   （增加，减少），营养价值提高。

（4）蜂蜜的pH为4.6，乳酸菌的最适pH接近中性。工业制作蜂蜜酸奶时，需向蜂蜜中加入过量的CaCO₃，进行该处理的目的是   ▲   。

（5）据表中数据，A组比B组转化率低的原因最可能是培养基中缺少乳酸菌所需的   ▲   （类）营养物质。D组比C组转化率高表明蜂蜜中含有乳酸菌生物所需的   ▲   （类）营养物质。

（6）近年来，少数不法奶农长期向奶牛的饲料中添加过量的抗生素。这些奶牛所产的鲜奶制作酸奶时很难成功，原因是   ▲   。

（2）制作食醋所用的菌种是        ，根据其对氧气的需求判定，其属于         。

（3）在制作葡萄酒的过程中，应将温度控制在18-25℃，在制作葡萄醋时应严格控制温度在30-35℃，这样做的原因是                                        。

（4）果汁发酵是否产生酒精，可用               检测。

（5）要想在实验室对酵母菌和醋酸菌进行纯化，接种的方法最常用的是            和           。