已有研究证实,在体外培养条件下耐药基因能够在不同种属的乳酸菌菌株中发生转移。鉴于此,科研小组对市售酸奶中的乳酸菌进行分离和鉴定,通过药物敏感性实验确定菌株的耐药谱,同时调查环丙沙星、庆大霉素、四环素等耐药基因在这些菌株中的分布情况,为乳酸菌的安全评价提供参考依据。请分析回答下列有关乳酸菌培养过程中的相关问题:

(1) 本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙,乳酸菌产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙,从而在菌落周围形成溶钙圈。从功能角度分析,本研究使用的培养基属于______。 

(2) 在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,锅内水加热煮沸后,必须____,以保证锅内气压上升、温度升至121 ℃,灭菌后的培养基应适当冷却后,在____附近倒平板。 

(3) 在酸奶制作过程中要严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,通常所指的发酵条件包括_____________(至少写出两项)。一般情况下含抗生素牛奶不宜制作酸奶,原因是_______________。 

(4) “检测乳酸菌对环丙沙星、庆大霉素、四环素耐药性”实验中,____(选填“需要”或“不需要”)设置对照实验,培养基配制好后再分别接种____。 

(5) 在统计菌落时,发现0.1 mL稀释倍数为10⁵的稀释液在平板上的平均菌落数为40个,则每毫升样液中的乳酸菌数大约为____个。用此法测定的乳酸菌数量比实际活菌数量____,原因是______________。 

请回答下列问题：

  (1)果酒制作过程离不开酵母菌，其新陈代谢类型为________型。葡萄酒的自然发酵过程中，菌种主要来自于附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。如果要从中分离纯化酵母菌，最常用的接种方法是________和稀释涂布平板法。葡萄酒制作成功与否，经发酵后需用酸性条件下的___________来检测。

  (2)泡菜制作离不开乳酸菌，其在无氧条件下，将葡萄糖分解成___________。腐乳制作过程中，卤汤是由酒及各种香辛料配制而成，酒含量一般控制在_________左右。

  (3)醋酸杆菌属于___________核生物，其细胞结构中__________(填“含有”或“不含有”)线粒体。

  (4)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_________法，之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分___________等问题。

  (5)要鉴定分离得到的微生物，常需要借助生物化学的方法。如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入____________，可用来鉴定分解尿素的细菌。

请回答下列有关微生物的一些问题。

（1）微生物的消毒和灭菌：在微生物培养中，对培养基常用_________法进行灭菌；静止空气中的细菌可用___________杀灭，原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。如果要检测培养基灭菌是否彻底，可以采用的方法是_______________________观察培养基上是否有菌落产生。

（2）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式：____________________。在果醋制作时，运用醋酸菌在_____和糖源充足时，将葡萄糖分解成醋酸。

（3）微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的_________（填“选择”或“鉴别”）培养基中加入________指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变___色。

（4）微生物的接种：微生物的接种方法很多，最常见的是____和_______。

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_______，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请回答下列问题：

(1)培养基中加入的化合物A是________。本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养，目的是______________________。

(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入________溶液，等培养基上长出菌落后，能产生纤维素酶的菌落周围会出现________。

(3)为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用________法进行接种。若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是________________________________________________________________________。

(4)用三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定(结果如图)。

据图分析可知，三种菌株对________的降解作用最强。与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中________的降解率变化最大。

某生物兴趣小组按下图所示过程从土壤中筛选能降解纤维素的细菌。回答下列问题:

（1）步骤②是___________。为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一碳源为___________，这种培养基属于___________（填“鉴别”或“选择”）培养基。

（2）上述接种等操作都应在酒精灯火焰附近进行的原因是___________。一般在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是______________________。

（3）将接种后的培养基和作为对照的______________同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入_________________。选取鉴定出的具有较大透明圈的菌种可接种到___________培养基上临时保藏。

为了调査成都自来水的水成情况，某研究小组对自来水水样中的细菌含量进行了测定，请回答下列问题：

（1）在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是       。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养基      培养。

（2）若小组采用平板划线法分离水样中的细菌，划线时落在培养基上共画了5个区域，则共需要    次灼烧接种环。

（3）检测自来水中大肠杆菌的数量,可选用伊红美蓝培养基，伊红美藍培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外，还可以提供      等基本营养成分。该培养基从功能方面属于       培养基。

（4）为了保证居民生活饮用水的安全，经常需要测定饮用水中大肠杆菌的数目。具体操作是将已知体积的饮用水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现      ，根据菌落的数目，计算出饮用水中大肠杆菌的数量，这种测定细菌的方法称为            。

（5）该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，如果接种后一个平板经培养后的菌落分布如图所示，推测接种时可能的操作失误是        。

【生物——选修1：生物技术实践】

从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

（1）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_____________，获得图B效果的接种方法是_____________。在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现_____________，表明菌已分离。

（2）对培养基进行灭菌的常用方法是_____________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板_____________。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养(成分见下表）:

注：“+”表示有，“-”表示无，CR溶液（刚果红）。据图判断:

培养基甲____________(填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________________；

培养基乙不能用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是培养基中没有纤维素，不会形成CR纤维素___________颜色复合物。

下图是从土壤中筛选产腺酶细菌的过程。

（1）图中选择培养基应以_______为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_____色。

（2）腐乳制作的实验流程示意图：豆腐长出毛霉→A→加卤汤装瓶→密封腌制图中A代表____________。在配制卤汤中酒的含量一般控制在______左右。

（3）工厂利用苹果生产果汁、果酒和果醋的大致工艺流程如下：

严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件包括_____(至少写出两项）。

（4）玫瑰精油的提取实验中，对初步接收到的乳浊液进行如下处理：

提取试剂A是_________________， 试剂C是______________________， 试剂C的作用是_______________________________________________。

（5）桉树油一般从新鲜的桉树叶中提取，过程如下：桉树叶＋水→A→油水混合物→分离油层→除水→桉树油提取桉树油釆用的方法是_________________________________。