4．
已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶，脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用 ______ 染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 ______ （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 ______ 为碳源的固体培养基进行培养．
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 ______ 直接计数，若要测定其活菌数量，可选用 ______ 法进行计数．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ______ ℃条件下该酶活力最小，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ______ ℃设计后续实验．