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            • 1. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题:
              (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶.其中的葡萄糖苷酶可将 ______ 分解成 ______
              (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成 ______ 色复合物.用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 ______
              (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见表):
              酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液
              培养基甲 + + + + - + +
              培养基乙 + + + - + + +
              注:“+”表示有,“-”表示无.
              据表判断,培养基甲 ______ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ______ ;培养基乙 ______ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ______
            • 2. 某些农作物秸秆富含纤维素,纤维素经过水解可以形成葡萄糖,葡萄糖再经过发酵可以生产酒精.如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程,请回答下列问题:

              (1)农作物秸秆含有丰富的纤维素,纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖.人们常常从土壤中分离纤维素分解菌.分离纤维素分解菌常用的方法是 ______ 染色法.其实验流程是:土壤取样→选择培养→ ______ →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生 ______ 的菌落.
              (2)纤维素分解菌能合成纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少含有三种组分,即 ______ .前两种酶使纤维素分解成 ______ ,第三种酶将它分解成葡萄糖.
              (3)图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌,若要提高酒精的产量,发酵过程中关键要控制好哪些条件? ______ .(至少填写2项).发酵后是否有酒精产生,可以用 ______ 来检验.
              (4)利用葡萄能生产果酒,进而生产果醋,生产果醋常用的菌种是醋酸杆菌,醋酸杆菌与酵母菌在代谢类型上的区别是 ______
            • 3. 某生物兴趣小组打算进一步探究纤维素分解菌的作用,请帮助完成相关实验设计:
              (1)问题:纤维素分解菌能否分解淀粉呢?
              (2)假设: ______
              (3)实验步骤
              ①配制两份相同的含淀粉的且适合纤维素分解菌生长的液体培养基.
              ②向其中一组培养基 ______ ,另一组不做处理.
              ③将上述两组培养基置于相同且适宜条件下培养一段时间.
              ④向两组培养基中分别滴加3滴碘液,观察颜色变化.
              (4)实验结论:
              ①若 ______ ,则假设成立.
              ②若 ______ ,则假设不成立.
            • 4. 某些农作物秸秆富含纤维素,纤维素经过水解可以形成葡萄糖,葡萄糖再经过发酵可以生产酒精.如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程,请回答下列问题:

              (1)纤维素分解菌能合成纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少含有三种组分,其中前两种酶使纤维素分解成 ______ ,第三种酶将它分解成葡萄糖.
              (2)图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌,在酒精发酵时一般将温度控制在 ______ ℃,方程式可表示为 ______ ,发酵后是否有酒精产生可以用 ______ 来检验.
            • 5. 分离分解纤维素的微生物的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选符合要求的菌落.请回答下列问题.
              (1)“土壤取样”一般选择 ______ 的环境.进行选择培养的目的是 ______
              (2)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将 ______ 分解成 ______
              (3)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成 ______ 色复合物,但不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 ______ .据此可以筛选纤维素分解菌.
              (4)为从土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
              酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液
              培养基甲 + + + + - + +
              培养基乙 + + + - + + +
              注:“+”表示有,“-”表示无.
              据表判断,培养基甲 ______ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ______ ;培养基乙 ______ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ______
              (5)将样品用 ______ (填“划线法”或“涂布法”)接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上,具体操作都要在 ______ 附近进行.
            • 6. 请根据所学知识回答下列生物技术实践中的有关问题:
              (1)通过花药培养产生花粉植株,该过程依据的生物学原理是 ______ . 在花药培养中,常常会出现 ______ 的变化,因此需要对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选.
              (2)在配制用于植物组织培养的MS培养基时,往往需要加入适量的蔗糖,理由是 ______
              (3)分解纤维素的微生物可以从土壤中分离获得,分离的基本过程如下:土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落.其中选择培养的目的是增加 ______ 的浓度,以确保能够从样品中分离到所需的微生物,鉴别该种微生物需要加入的特殊物质是 ______ ,该物质能够与纤维素反应生成红色复合物;如果某个菌落的周围出现了透明圈,说明该种微生物能够 ______
              (4)食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌,为测定哪些菌落属于大肠杆菌,可选用 ______ 培养基对该菌落进行鉴定,大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现 ______ 色.
            • 7. (14分)

              Ⅰ.转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞,进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内,最终获得转基因克隆猪。请回答:

              (1) 在对猪纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的           ,以防止培养过程的污染。此外,应定期更换培养液,防止              对细胞自身造成危害。

              (2) 筛选转基因细胞时,需要用到基因表达载体中的               

              (3) 在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集             ,并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入           中,再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

              (4) 为了提高重组胚胎的利用率,可对处于           阶段的胚胎进行均等分割,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地,代孕母猪需要用激素处理,促使其           以利于受孕。

              Ⅱ.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答:

              (1) 分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有              (至少答2种)。

              (2) 可用                法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中,要在          旁进行操作,接种后的培养皿            于37℃的            中培养。

              (3) 用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的            使PH升高,使酚红指示剂产生颜色变化,从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力                

            • 8. 研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物.请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题:
              (1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即 ______
              (2)若获得纯净的菌株,常采用 ______ 进行接种,此过程所用的接种工具是接种环,操作时采用 ______ 灭菌的方法.
              (3)刚果红可以与纤维素等多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的 ______ 和葡萄糖发生这种反应.常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;第二种是在 ______ 时就加入刚果红. ______  (填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混杂.
              (4)如果观察到产生 ______ 的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌.为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验.
              (5)如图为实验室培养和纯化菌种过程中的部分操作步骤,下列说法错误的是 ______
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              A.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
              B.步骤③中,每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理
              C.步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖
              D.划线接种结束后,将图④平板倒置后放入培养箱中培养.
            • 9. 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,下列是关于分离土壤中能够分解纤维素的微生物的相关问题,请回答:
              (1)自然界中纤维素含量最高的天然产物是 ______ .某些微生物能分解纤维素,因为他们能产生纤维素酶,纤维素酶至少包括三种组分,即 ______
              (2)实验室中筛选微生物的原理是 ______ .筛选纤维素分解菌应先将从土壤中获得的微生物,在以纤维素为唯一碳源的 ______ (填“固体”或“液体”)培养基上进行选择培养,选择培养的目的是 ______
              (3)用刚果红染色法对分离出的微生物进行筛选,刚果红可以与纤维素形成 ______ ,当纤维素被纤维素酶分解后,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的 ______ .从培养基的用途上分类,刚果红培养基属于 ______ 培养基.
            • 10. 有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等.研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物.分析回答问题:
              (1)培养基中加入的化合物A是 ______ ,为微生物的生长提供 ______ ,这种培养基属于 ______ 培养基.
              (2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物,向培养基中加入 ______
              (3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前,可用液体培养基培养,增加微生物的浓度.若获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是 ______ ,操作时采用 ______ 灭菌的方法;还可用 ______ 方法操作.
              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是 ______
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