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            • 1.

              经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株,菌体自身不能合成天冬氨酸,必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题:


                  (1)过程①接种的方法是________________。待测培养皿中的培养基是___________(答“基本”或“完全”)培养基。

                  (2)过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落,先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到_______________(答“基本”或“完全”)培养基上,原因是____________________。

                  (3)完成②过程的转印并在28℃的培养箱中培养2天后,两个平板上出现的菌落有的相同,有的不同。完全培养基上出现的菌落A和菌落B中,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是_________菌落(答“A”或“B”),原因是___________________。

                  (4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,科研人员又制备了甲、乙两个平板,这两个平板中营养成分的差异是________________。将待鉴定菌种接种到两个平板中,置于适宜条件下培养一段时间后,若观察到两个平板中菌落的生长情况是__________,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

                  (5)临时保存该菌种时,可将菌种接种到试管的______上,在合适的温度下培养。长期保存时可采用________的方法。

            • 2.

              樱桃番茄富含多种天然有机酸、人体必需氨基酸、维生素和多种矿物质,但因其含糖量不高,影响酒精发酵效果,经实践摸索,调整发酵工艺,樱桃番茄成为酿造保健酒的好原料。下图1是利用固定化酵母或游离酵母发酵樱桃番茄果酒的工艺流程,请分析回答:


              (1)主发酵结束后,需将上层酒液转移到另一灭菌容器中进行后发酵,为了防止醋酸菌污染,加入容器中液体的量应______(填“注满”、“2/3”或填“1/3”),以保证果酒品质。

              (2)图2是固定化酵母发酵与游离酵母发酵的对比结果,从图中可以看出,两者发酵速率相近,但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多,主要原因是________________;后期游离酵母发酵速度减慢,除了底物浓度降低外,还可能是因为_______________。

              (3)为探究固定化酵母重复使用的效果,对固定化酵母进行了2次连续的重复发酵实验,图3是实验的结果,试分析在第2次发酵前期,酵母降糖速度明显加快的原因___________。实验结果说明固定化细胞具有_________________的优点。

              (4)用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞,溶解海藻酸钠时最好采用________的方法,以防发生焦糊。溶化好的海藻酸钠溶液应__________后,再与已活化的酵母细胞充分混合。若海藻酸钠浓度过低,会导致__________________,固定效果大大降低。

              (5)为分离纯化优良酵母菌品种,采用平板划线法进行如下操作,排序最合理的是________。

              A. ②①④③    B. ②①④①③②    C. ②①④②③②    D. ①④①③②

            • 3. 为了调查濠河的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:


              (1)制备实验所需的培养基时,在各成分都溶化后和分装前,要进行的是   __   和灭菌,对培养基进行灭菌的常用方法是   __   。倒平板时要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要原因是   __   

              (2)该小组可采用上图②所示的   __   (方法)检测水样中的细菌含量。在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是   __   ;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数   __   

              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是   __   

              (4)在纯化过程中,在固体培养基上划线分离过程中,正确的操作是   __   

              A.每次划线时,接种环都需要蘸菌液一次

              B.划线分离时,需要把接种环深入到培养基中进行接种

              C.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

              D.在超净平台中进行接种时,不能关闭过滤风

            • 4.

              I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长,进而形成菌落.回答下列问题:


              KH2PO4

              1.4g

              Na2HPO4

              2.lg

              MgS04•7H2O

              0.2g

              葡萄糖

              10.0g

              尿素

              1.0g

              琼脂

              15g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL



              (1)该培养基可筛选的细菌是______,判断的依据是______。
              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,需要对样本中的细菌进行扩大培养,请判断能否用表格中的培养基来扩大培养______(填“能”或“不能”),理由是__________________。

              (3)如果需要对该细菌进行计数,则应用______法接种.为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时,每一次划线前都要进行灼烧,目的是________________________。


              II.叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中,该技术能有效改良植物的品质。回答下列问题:

              (1)转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增,该技术的原理是_______________。

              (2)将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______,再将目的基因导入其中,最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

              (3)对大多数高等植物而言,与传统的细胞核转基因相比,叶绿体转基因更稳定,其遗传方式______  (填“遵循”或“不遵循”)孟德尔遗传定律,不会随______(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而保持了母本的遗传特性。

              (4)来自原核生物中有重要价值的外源基因,无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达,原因是 _________________。

            • 5.

              为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”,某同学进行了如下实验:

              请分析回答下列问题:

              (1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是________。

              (2)接种微生物的方法有很多,图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是________。用该方法统计样本菌落数后,

              所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml),这里的n=________。

              (3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:

              步骤1:分别取________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间,观察比较培养基中菌落生长情况。

            • 6. 泡菜是中国人喜欢的食品,每年到了白菜、青菜、萝卜收获的季节,各家各户都会选恰当的时间,腌浸过冬食用的泡菜。请回答下列有关问题:

              (1)泡菜制作时发挥主要作用的微生物是乳酸菌,常见的乳酸菌有________两类。泡菜具有独特的酸味,主要是因为________,该反应过程中,底物所含的稳定化学能的主要去向是________。

              (2)实验室可采用________法进行乳酸菌菌种纯化,在对该菌种进行培养时,与常规微生物培养基相比还需要额外在培养基中添加________。实验室测定泡菜中亚硝酸盐的含量时,亚硝酸盐首先与________发生反应,随后再通过相关反应形成玫瑰红色染料,再与已知浓度的________进行比色。

              (3)市场上购买的真空包装泡菜,在没有发生漏气的状态下发生了“胀袋”现象,甲同学怀疑是杂菌污染导致的,乙同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说明理由:________。

            • 7.

              为了调查某学校附近河流的水质状况,该学校生物兴趣小组测定了河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:

              (1)如图,该小组采用的是_______________分离水样中的细菌。操作时,接种环通过_________灭菌,在第二次及以后的操作时,总是从上一次的末端开始,这样做的目的是____________________________________。

              (2)该实验组将接种好的培养皿在恒温箱中培养时倒置,其目的是_________________________;在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为 __________________。

              (3)根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,原因是_____________________________________。除了上述的活菌计数法外,______________也是测定微生物数量的常用方法。

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:________________

            • 8.

              金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题:

              图A    图B  

                                                 

              (1)从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行______________呼吸。

              (2)7.5% NaCl肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括____________________________,用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是____________________________。

              (3)若接种后获得的结果为图B所示,则所接种方法如图______________所示。 

              (4)按培养基功能分类,血平板属于______________培养基。

              (5)经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现______________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是____________________________。

            • 9.

              实验人员从环境中分离获得白腐菌,以白腐菌的菌丝或孢子制得固定化白腐菌凝胶颗粒,各取25个两种凝胶颗粒分别处理50 mL染料废水,实验结果如下图1。进一步研究不同数量的凝胶颗粒处理50 mL染料废水结果如图2。据图分析回答:

                   

                                  图1                                        图2

              (1)从野外采集白腐菌前,先向待采集土壤喷洒适量的染料废水的目的是________。某同学在进行白腐菌分离纯化实验时,划线某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成第一条划线无菌落可能的操作失误是________。将收集到的菌丝或者孢子加入到适量的海藻酸钠溶液中混匀,抽取5 mL混合液,滴加到CaCl2溶液中,该过程中CaCl2溶液的作用是______。

              (2)现要处理100 L皮革生产过程中产生的染料废水。从实验结果分析,应选用________凝胶颗粒,添加________个凝胶颗粒后,保持________天以上,以达到最好的净化效果。

              (3)与向染料废水中直接接种白腐菌相比,在工业生产中使用固定化白腐菌凝胶颗粒的优点主要是_____________________________________________。

            • 10.

              回答下题:

              (一) 酿酒、造醋是我国的传统技艺,为了探究与改进制造工艺,进行了相关研究。请回答有关问题:

              (1)目的菌株筛选后应该利用     培养基进行扩大培养,       是消除污染杂菌的通用方法。

               (2)制作葡萄酒过程中,为了酵母菌迅速发生作用,可加少量      混匀。将葡萄浆放入发酵瓶,装量不超过      (A.1/2 B.2/3 C.3/4 D.100%),当发酵瓶       表示发酵完毕。

               (3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至       ,将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒-水混合物中,混匀,并调PH至       后,倒入发酵瓶。

              (二)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。请回答相关问题:



              (1)过程①中构建重组表达载体所需要的酶是限制性核酸内切酶和      。(A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.解旋酶)

              (2)在过程②中,用       处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞,置于    中培养。

              (3)在过程③中,一般用     激素处理供体母牛,使其超数排卵;对供体母牛和代孕母牛进行           处理。

               (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是          。在胚胎移植前,通过                技术可获得较多胚胎。

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