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            • 1． 微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请回答下列问题：
              （1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自    的土壤．
              （2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用    培养基．常用的接种方法是    或    ．
              （3）接种后，应密封培养的原因是    ，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取    就可获得高效菌株．
              （4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数．取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为    个/mL．该统计结果    （低于、高于）实际值．
              难度：中等
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            • 2． 大肠杆菌有许多菌株，野生型菌株在普通培养基中就能成活，菌株A：met- bio-thr+ leu+thi+需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素，菌株B：met+bio+ thr-leu- thi-需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫胺．科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验．回答下列问题：

              （1）如图1所示，菌株 A 和 B混合培养几小时后，把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上，发现长出了若干野生型菌落，对此实验现象可作出如下假设：
              ①不同大肠杆菌间遗传物质发生重组．
              ②    ．
              （2）为了探究上述假设①，有人设计了一种U型管（如图2），中间用过滤器隔开，大肠杆菌不能通过，但培养液和营养物质可通过，实验如下．请补充相关实验内容：
              实验步骤：
              ①在U型管中加入    ；
              ②U型管两端各加入菌株A、菌株B，培养几小时；
              ③将U 型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在    上，观察有无菌落．
              实验结果：    ．
              实验结论：菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组．
              （3）现有1升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至103倍．各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为31、34、37，则每升原水样中大肠杆菌数为    ．该数据理论上比细菌实际数目    ．
              （4）该实验中需要灭菌的是    ．（至少写3个）
              难度：中等
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            • 3． 牛肉膏蛋白胨培养基是微生物培养中常用的培养基，其中的蛋白胨为微生物的生长提供了    等营养物质，制备的培养基一般用    方法进行灭菌．人类饮用水的安全与人体健康关系密切，欲将所取的金沙江水样品进行大肠杆菌的分离与计数，可用    法来完成．
              难度：中等
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            • 4． 根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：
              （1）当糖源充足或缺少糖源时，醋酸菌分別能将    物质最终转变成醋酸．
              （2）为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验：
              KH2PO4Na2HPO4MgS04•7H2O葡萄糖尿素琼脂H2O
              1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0glOOOmL
              若在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培养的细菌起到    的作用．若取土样4g，应加入     ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将104-107倍的稀释液分别吸取0.2mL加人到固体培养基上，在对位稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为：219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为    （小数点后保留一位小数）．
              （3）若为了获得更多青蒿素，霱将青蒿离体的细胞或组织培养成愈伤组织．青蒿的细胞分裂、组织分化能力比菊花困难一些，需要借助外源激素才能更好的分裂和分化．若上述培养基用来进行青蒿细胞、组织的组织培养，还应加入的具体植物激素是    ．
              （4）若在青蒿素的提取过程中需用果胶酶，探究果胶酶最适用量时的自变量是    ．
              （5）若用凝胶色谱柱分离果胶酶大分子蛋白质时，果胶酶在色谱柱中移动的速度是    ．
              （6）胡萝卜素粗品用    法进行鉴定，鉴定过程中需用    作为对照．
              难度：中等
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            • 5． 微生物与人类关系密切．虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的．请回答下列问题：
              （1）培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐．从土壤中分离分解尿素的细菌时，培养基中加的唯一氮源为    ，这种培养基称为    培养基．
              （2）在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，为什么要将平板倒置？    ．
              （3）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和    法．在用平板划线法接种时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环    ．
              在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？    ．
              难度：中等
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            • 6． 幽门螺杆菌病是一种螺旋形、微厌氧、对生长条件要求十分苛刻的细菌．1983年首次从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜活检组织中分离成功，是目前所知能够在人胃中生存的惟一微生物种类，常通过食物等媒介物传播，易引起多种胃部疾病．下图为幽门螺杆菌显微图象．

              （1）图甲中A指的是    ，幽门螺杆菌所含有的细胞器是    ．
              （2）从物理状态分，表格所示培养基属于    培养基，该培养基配置时，应将pH值调整后，再进行    ，最后倒平板备用．
              成分含量（g/L）
              蛋白胨10
              牛脑浸出粉10
              牛心浸出粉9
              氯化钠5
              葡萄糖2
              磷酸氢二钠2.5
              水1L
              （3）如要进行幽门螺杆菌的分离，下列条件或操作适宜的组合是    
              A．pH=2   B．pH=7    C．pH=9     D．28℃E．37℃F．高氧    G．低氧    H．无氧
              I．正置培养   J．倒置培养    K．加青霉素    L．不加青霉素
              （4）请在图乙中画出在培养皿中进行幽门螺杆菌单菌落分离时所用方法的操作轨迹．
                  
              （5）若某人被检测出携带有幽门螺杆菌，则下列做法不合适是    ．
              A．及时使用抗生素等药物对患者进行治疗
              B．避免与患者共餐以免传染
              C．日常接触中佩戴口罩
              D．加强自身锻炼，增强自身免疫力．
              难度：中等
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            • 7． 回答下列关于微生物的问题．
              1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌．幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的螺旋状短杆菌，具有强的脲酶活性，是慢性活动性胃炎、消化性溃疡和胃癌的主要致病原因．
              （1）下列关于幽门螺杆菌的说法中，正确的是    （多选）
              A．为古细菌，因为其能生活在酸性环境下
              B．储存其遗传物质的主要场所是拟核，该菌含有质粒，可以为基因工程提供载体
              C．该菌合成和加工脲酶所涉及的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体等
              D．该菌对青霉素、利福平敏感
              如表是某培养基的配方：
              成分葡萄糖KH2PO4MgSO4NaClCaSO4CaCO3琼脂蒸馏水
              含量10g0.2g0.2g0.2g0.2g5g3.5g1L
              （2）用    法将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，置于37℃下培养一段时间后，在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时    ，主要原因是：    ．
              （3）幽门螺杆菌形态如图1所示，幽门螺杆菌生长的最适pH为6～7，人体胃腔内pH在1～2之间，但胃粘膜的粘液层靠近上皮细胞侧pH为7.4左右．若幽门螺杆菌随食物进入胃腔，结合其结构特点以及能导致胃溃疡的特性，推测该菌在胃内如何存活？    

              （4）幽门螺杆菌的传染力很强，可通过手、不洁食物、不洁餐具、粪便等途径传染，涉及传染病传播途径中的    （多选）
              A．空气传播      B．接触传播      C．媒介物传播      D．病媒传播
              （5）2015年，首例口服抗幽门螺杆菌疫苗在我国研制成功，图2中，能准确反映幽门螺杆菌疫苗接种者血清中抗幽门螺杆菌抗体的浓度随时间变化趋势的是    ．
              难度：中等
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            • 8． （2016•中山市校级模拟）微生物培养技术在医疗、工业生产、食品生产等方面均有应用．如表是一种培养基的配方，请回答：
              牛 肉 膏蛋 白 胨NaCl琼  脂水
              0.5g1g0.5g2g200ml
              （1）此培养基中的蛋白胨主要为微生物提供    ．在各种成分溶化后分装前，必须进行的是    和灭菌．
              （2）临床使用抗生素前，有时需要进行细菌的耐药性试验，其大致过程是：将含有某种细菌的菌液用    法接种在培养基表面并进行培养，最终形成单个的菌落；再分别将含有等剂量不同种抗生素的相同大小的圆形滤纸片置于该平板上有菌落的位置，继续培养一段时间后，若滤纸片下的菌落死亡，说明该细菌对该抗生素    ．（填“敏感”或“不敏感”）
              （3）用上述方法统计菌落数目时，一般选择菌落在    的平板进行计数，在某一稀释度下平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2ml，稀释倍数为105时，则每毫升样品中的菌落数为    ．在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有    （填序号）．
              ①由于土样不同　②由于培养基污染　③由于操作失误　④没有设置对照
              （4）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用    法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选．甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于    ．
              A．③B．①②C．②③D．①②③
              难度：中等
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            • 9． 人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源．现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
              （1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有    ．
              （2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程 每一步都要在    旁进行操作．接种后的培养皿    于37℃的    中培养．
              （3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于      培养基．若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的    使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力    ．
              （4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数    ．
              A．多        B．少        C．相等        D．几乎为零．
              难度：中等
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            • 10． 工厂废水的妥善处理是减轻现代化工业水污染的重要举措．如图所示为筛选某种高效分解某化工厂的污水中有机化合物A的菌种的实验流程．请分析回答下列问题：
              （1）图中所配制的培养基应以    为唯一碳源，该培养基在功能上属于    培养基．
              （2）实验过程中，“振荡”的目的是    ，由此推断该目的菌的呼吸类型与乳酸菌的呼吸类型    （填“不同”或“相同”）．
              （3）转为固体培养基时，常采用平板划线法或    进行接种，两种方法在此过程中所用的接种工具分别是    和    ，操作时对接种工具采用的灭菌方法是    灭菌．
              难度：中等
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