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            • 1. 研究发现,长期饮酒能使大鼠小肠黏膜需氧菌总数增加,这些菌类过度生长可增加对并源性乙醇的氧化,导致大量有害的乙酸盐和乙醛在肠道内积累,从而导致一系列疾病的发生。某研究小组从大鼠肠道中筛选出降解乙醛的菌株,并开展研究,回答下列问题:
              (1)为了筛选出能够高效降解乙醛的菌株,在培养基中需要添加蛋白胨、酵母提取物、NaCl等物质后,还需要添加______。
              (2)采集大鼠小肠内容物,在______环境中接种到培养液中,并采用操床培养的目的是______。
              (3)通过______法将上述菌液接种到______培养基上,进一步纯化培养。
              (4)若将降解乙醛的酶固定在不溶于水的载体上,使用固定化酶技术,其优点是使酶既能与反应物接触,又能与______,固定在载体上的酶还可以被______。
            • 2. 青霉素酰化酶,又称为青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶。该酶主要从大肠埃希菌胞内酶和巨大芽孢杆菌胞外酶中获得,该酶已大规模应用于工业生产头孢类抗生素。某制药厂致力开发新产品,生产头孢类抗生素药物。欲通过人工诱变的方法获得高产青霉素酰化酶的微生物,制备并固定化青霉素酰化酶。根据相关信息回答问题:
              (1)在获得髙产青霉素酰化酶的微生物时,从理论上分析选择对______进行诱变处理后,筛选出的髙产菌株更有利于生产,原因是______,而菌体可以继续进行发酵培养。
              (2)在研究中发现,髙产菌株会产生多种分子量不同的酶,且均不会被RNA酶降解。在分离纯化青霉素酰化酶时,适合采用______法;之后需要对其纯度进一步鉴定,使用最多的方法是______。
              (3)除显微镜直接计数法外,还常用______法进行活菌计数,其原理是______。为防止人员感染和污染环境,实验人员离开实验室时,一定要做的事情是______。
            • 3. 已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶.脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产.回答有关问题:
              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用于______ 染色.微生物A产生的油脂不易挥发,可选用______(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取.
              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以______为碳源的固体培养基进行培养.
              (3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用______ 直接计数;若要测定其活菌数量,可选用______ 法进行计数.
              (4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,______℃条件下该酶活力最小.为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕______℃设计后续实验.
              (5)若需克隆脂肪酶基因,可应用______技术.
            • 4.
              现在大力提倡无纸化办公,但是仍然不可避免的每年要产生大量的废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的资源--乙醇.如图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程,请回答相关问题.
              (1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在 ______ 的环境中.将从土壤中获得的微生物培养在以 ______ 为唯一碳源,并加入 ______ 的培养基上筛选周围有 ______ 的菌落.
              (2)如上所述的筛选中获得了三个菌落,对它们分别培养,并完成②环节,且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同,则你认为三种酶液的活性 ______ (填“一定相同”、“不一定相同”或“一定不同”),可以通过 ______ 进行定量测定.
              (3)根据测定结果,①环节常选择木霉,则②环节中获得的酶是 ______ 酶.该酶至少包括 ______ 三个组分.
              (4)生产中可以满足④环节的常见菌种是 ______ ,为了确保获得产物乙醇,⑤环节要注意 ______ ,④环节要注意 ______ .
            • 5.
              甘蔗是一种高光效的植物,单位面积产量很高,目前已成为燃料酒精生产的重要原料.与化石燃料相比,酒精燃料可以再生,而且二氧化碳排放量少,具有低能耗、低污染、低排放的特点,为基础的低碳经济模式.
              (1)利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为甘蔗一榨汁(蔗糖)一酵母发酵一蒸馏一成品(燃料酒精)-蔗渣由微生物分解再利用.具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:
              步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理.
              步骤2:从野生菌液中分离出理想的酵母菌菌种,需要用到 ______ 培养基,制备该培养基时要注意 ______ 和 ______ .加琼脂后灭菌,制成固体培养基.为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长,需将培养皿 ______ .
              步骤3:将紫外线照射后的菌液稀释,涂布在固体培养基的表面.接种操作一定要在酒精灯火焰附近进行,原因是 ______ .
              步骤4:根据是否能在该培养基上生长筛选出突变菌.由上述歩骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比,具有 ______ 的特点.
              (2)利用获得的突变菌和榨汁进行酒精发酵实验,除了将培养基灭菌、保持空间洁净外,发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有(列举一种) ______ .
              (3)酵母茵不能分解蔗渣,因其不含有能够分解蔗渣的 ______ 酶,若从土壤中分离具有这种酶的微生物,所需要培养基中的碳源为 ______ .
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