【加试题】回答下列（一）（二）小题

（一）请回答黄花蒿植物组织培养的有关问题：

（1）黄花蒿的植物组织培养研究在我国已有数年历史。选取黄花蒿的茎段后，通常用体积分数为70%的酒精等药品对茎段进行________，然后再放入________溶液中浸泡，最后用无菌水冲洗。若外植体不慎被细菌感染，采用划线分离法纯化细菌，在4个区域内划线需要将接种环灼烧灭菌________次。

（2）植物组织培养的培养基可采用________灭菌。形成愈伤组织的过程中，除需无菌、营养和激素外，________等外界条件也很重要。

（3）2-3周后将生长健壮的丛壮苗在________（A.LB培养基+适宜浓度BA  B.LB培养基+适宜浓度NAA C.MS培养基+适宜浓度BA  D.MS培养基+适宜浓度NAA）上继续生根，形成完整植株。定植前，还需逐渐________进行炼苗。

（二）世界首个细胞核移植“三父母”婴儿已于2016年4月诞生，引起全球广泛关注。医生首先从母亲的卵细胞取出细胞核，并将其注入已去掉细胞核的捐赠者的卵细胞内，重组细胞就拥有了母亲的核DNA以及捐赠者的线粒体DNA，最后再利用精子进行体外受精。请回答：

（1）医生用这一方法同时培育了5个胚胎，因此母亲的卵巢事先需经________处理以获得更多的卵细胞；体外受精前，精子需经培养达到________状态。

（2）下列关于体外受精及胚胎工程的叙述，错误的是________

A．精子和卵细胞表面有特异性相互识别的蛋白

B．2-8细胞期的卵裂球每一个细胞都具有全能性

C．中胚层是由外胚层的细胞增殖分裂形成的

D．体外受精使用的培养液和早期胚胎培养液成分相同

（3）受精卵需经早期发育培养，才能完成植入或着床，通常移植的最适宜时期是________。胚胎发育到一定阶段，会形成滋养层细胞，这部分细胞将发育成________。

（4）在英国获得批准的 “三父母”技术则不同，是捐献者的卵细胞与父亲的精子经体外受精形成的受精卵去核后，注入父、母亲所形成受精卵的核，以剔除母亲线粒体中有缺陷的基因信息。该过程涉及的生物技术有体外受精、________、________和胚胎移植。

[生物——选修1：生物技术实践]

现有紫色不甜玉米（基因型为AABB）和白色甜玉米（基因型为aabb）两个品种，两对基因自由组合，如果要尽快培育出紫色甜玉米，可用单倍体育种的方法，请回答有关问题：

（1）可将两个品种的玉米进行杂交得到F₁，用F₁的花药进行离体培养，可得到________倍体花粉幼苗，这些花粉幼苗的基因型包括________，再经过人工诱导，即可获得所需的品种。与杂交育种相比该育种技术的最大优点是________。

（2）通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径，一种是花粉通过________发育为植株，另一种是花粉在诱导培养基上形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株，愈伤组织的特点是________。

（3）在花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说，在________期，花药培养成功率高。为确定花粉发育时期，常用________法染色，若花粉细胞核不易着色，需采用________法染色。

回答与“植物的组织培养”有关的问题：

（1）植物组织培养常用的MS培养基是__________（液体/半固体/固体）培养基，菊花茎段的组织培养            （必须/不必）添加植物激素。

（2）无菌技术是影响植物组织培养能否成功的重要因素。用体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞对外植体__________，接种时每次使用器械后都需要__________灭菌；接种3－4d后，观察外植体的生长情况，若发现外植体被污染，分析其原因可能是_____                         、                             。（答出两点即可）

（3）再分化过程中，若愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其可能的原因是                                      __。

（1）植物组织培养的原理是                 ，该培养基的物理性质是                 。

（2）组织培养要求无菌操作的目的是                                                。

（3）在愈伤组织形成过程中必须从培养基中获得的营养物质有                    等。

（4）离体的植物组织发育为胚状体，必需经过             和              过程；再由芽发育成叶和茎，这一过程需要光照，原因是                                            。

用多倍体育种的方法培育三倍体无子西瓜，每年都要制种，很麻烦。某活动小组同学们，想到了利用植物组织培养的方法来解决此难题。请回答与此实验相关的问题：

（1）离体的组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配置适宜的培养基。常用的一种培养基是          ，其主要成分包括：          、微量元素、有机物，还常常需要添加             ；对培养基要采用          方法灭菌。

（2）选取合适的外植体作为起始材料，接种前还要对其进行         处理。为提高组培成功率，常选择                  的材料做外植体。

（3）如果外植体选取的材料为茎段，插入培养基时应注意                 。培养一段时间后，会通过          形成愈伤组织。

如图表示菊花的嫩枝和月季的花药的离体培养过程，请回答：

（1）对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是                          ；对月季来说，花粉发育的过程中适宜花粉培养的时期是单核期。为确定花粉是否处于该时期，最常用的镜检方法是                                  。

（2）在植物组织培养常用的培养基名称为                  。培养基中都要加入一定的植物激素，在培养过程中，使用激素的顺序和比例都影响细胞的发育，细胞分裂素／生长素的比值     （高，低，相当）有利于根的分化。

（3）两种植物组织培养都需要接种，接种前为确定培养基是否灭菌彻底，检测的方法是                    。

（4）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过          阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于                        。

（1）提取绿叶中的色素时加入            可防止研磨时色素被破坏，叶绿体中含量最多的色素主要吸收                    光。

（2）图甲中bc段限制叶片光合速率的最主要环境因素是_______________，此时提高环境中CO₂的浓度，光合速率将________________(明显增大/基本不变/明显减小)，在图甲中cd对应时段，植物体内有机物总量的变化情况是_____________________。

（3）乙图中测得该植物一昼夜的O₂净释放量为300mg，假设该植物在24小时内呼吸速率不变，则该植物一天通过光合作用产生的O₂总量是________mg，光合作用速率最高时，光合作用每小时利用CO₂的量是_________mg。

（4）如要对某绿色植物进行植物组织培养，培养基中的细胞分裂素和生长素用量的比值         （填“高”、“低”、“相当”）时，有利于芽的分化，对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是                  。

下图是菊花茎尖离体培养示意图，据图回答下列问题：

(1)图中A是_______，B是__________。菊花茎尖培养成植物体的原理是___________。

(2) 试管苗形成过程中要给予一定光照，其目的是________________。

(3)脱分化是指脱分化和再分化这两个过程的进行还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的________，二是要__________。否则植物组织培养就不能成功。

(4)这样培养试管苗的繁殖方式是__________。

（1）图中D过程的方法称为_________。A过程所需的酶是_________和_________。

（2）图中重组质粒，除了含有目的基因外，还必须有___________、___________以及___________；目的基因能否遗传给后代常采用的检测方法是                                             。

（3）E过程需要运用__________技术，经过__________、___________过程最终形成植株，其依据的原理是__________。

（3）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植株产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过            阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于          。