蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（　　）

［生物一选修3：现代生物科技专题］

    现代生物科技不断发展，在治疗人类疾病方面发挥着越来越重要的作用。请回答下列相关问题：

    (1)囊性纤维病是一种遗传病，科学家们设计出基因治疗方法，利用经过修饰的腺病毒作为________，将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者的肺组织中，这种直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法叫作________________。

    (2)胰岛素是治疗糖尿病的有效药，天然胰岛素注射后会堆积在皮下，需较长时问才能进入血液，科学家利用______________技术对胰岛素进行改造使其成为速效药，提高了胰岛素的治疗效果。

    (3)单克隆抗体的出现能有效解决传统抗体产量低、特异性差的问题。在其制备过程中，需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出________________；如果将抗癌细胞的单克隆抗体与化学药物结合制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的________作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。

    (4)ES细胞的形态特征有_____________________________，功能上具有___________________。ES细胞可以治疗由于细胞坏死、退化和功能异常引起的人类疾病，如帕金森综合征，利用ES细胞可以被____________形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化部位得以修复。

如图是科学工作者利用苏云金杆菌体内的抗虫基因培育转基因抗虫水稻的培育过程。请据图回答下列问题：

（1）实验中如果用EcoR Ⅰ切割多个外源DNA片段和质粒，则酶切产物用_______进行连接后，两两连接所形成的产物有________种，实验中最好选择_______________切割外源DNA片段和质粒。请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由：_____________________  。

（2）利用PCR技术可获取目的基因，据图回答下列问题：

①PCR技术的原理是_____________，利用PCR技术获取目的基因的前提是_____________。

②由图中信息分析可知，催化C过程的酶是_______，它与正常细胞里的酶的区别是_________。

（3）转基因抗虫水稻的目的基因是否完成表达，从分子水平上的检测方法是__________________。      

（4）科学家发现该抗虫毒蛋白的杀虫效果不佳，然后通过____________或基因合成，对现有抗虫毒蛋白进行改造，这项技术属于_______________工程。

运用基因的定点诱变技术改造基因的碱基序列，生产符合人类需要的蛋白质。这种技术称为

(3)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过________工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计。

科学家运用基因工程技术将结核杆菌MPT64基因（能控制合成MPT64蛋白）成功导入胡萝卜细胞，最终表达出肺结核疫苗。回答下列问题：

（1）为获取MPT64基因，可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA，在___________的作用下合成双链cDNA片段，该cDNA片段_________(填“含有”或“不含有”)终止子。

（2）通常采用PCR技术扩增MPT64基因，前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列，原因是_________________，在操作步骤中需要加热至90～95℃的目的是__________。

（3） 构建基因表达载体时，根据农杆菌的特点，常将MPT64基因插入Ti质粒的　______，原因是___________________________________________。

（4）基因表达载体导入胡萝卜细胞后，要通过植物组织培养技术培育出幼苗，该技术在进行再分化时，除必要的营养供应和激素调节外，还必须给光照，原因是_____________________。该技术要求无菌操作，其目的是________________________________________。

（5） 要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达，应检测胡萝卜植株中是否含有______。

（6）科学家探知，若能把MPT64蛋白第20位和第24位的氨基酸都改变为半胱氨酸，可以更好保证所生产的肺结核疫苗分子的稳定性。该实例的操作_________(填“属于”或“不属于”)蛋白质工程，理由是__________________________________________________________。

（1）胚胎干细胞可由囊胚的_______细胞分离培养获得。

（2）利用PCR技术扩增干扰素基因时，需在______________酶的作用下进行。PCR技术主要利用了______________的原理。

（3）将经过修饰的腺病毒与干扰素基因重组形成的______________转移到ES细胞中，筛选出成功转移的细胞进行扩增培养。

（4）有人得到如图所示的含有目的基因的表达载体，但其不能在宿主细胞中表达目的基因产物，分析目的基因不能表达的原因是______________。

（5）由于干扰素很难在体外保存，为解决这一问题，可利用______________对干扰素进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→ 设计预期蛋白质的结构→ 推测应有的__________→ 找到对应的脱氧核苷酸序列。

已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P₁)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：

(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的________________进行改造。

(2)以P基因序列为基础，获得P₁基因的途径有修饰________基因或合成________基因。

(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过________________和____________________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质。

下列有关现代生物技术叙述，正确的是