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            • 1．

              转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点，据图回答下列问题。


              （1）若要获得抗病基因，可用_____________限制酶切，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。切割质粒与获取目的基因用的是___________（相同、不同）的限制酶。切割好的质粒与目的基因需要在_______________酶的作用下形成含抗病基因的重组DNA分子。

              （2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有__________________基因作为标记基因。

              （3）图中将重组DNA分子导入香蕉受体细胞用到的方法是_____________法。

              （4）为了进一步确定目的基因是否翻译成蛋白质，可用的检测方法是________。

              （5）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________________的方法，可培育成能表现新性状的植株。图中①到②表示______过程，②到③表示______过程。

              难度：易
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            • 2． 北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是

              A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序

              B．将多个抗冻基因的编码区依次相连成新的基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白

              C．过程②构建的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选

              D．转化后形成的番茄愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
              难度：难
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            • 3．
              通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物．运用这一技术使羊奶中含有人体蛋白质，如图表示了这一技术的基本过程，该过程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是一G↓GATCC-，请回答：

              （1）从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是 ______ ．人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中时需要的酶是 ______ ．染色体的主要成分是 ______ ；基因的基本组成单位是 ______ ．
              （2）人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内，原因是人和羊DNA分子的 ______ 相同．
              （3）将人体蛋白质基因导入羊体内并成功地表达，使羊产生新的性状．这种变异属于 ______ ，这里“成功地表达”的含义是 ______ ．
              （4）你认为此类羊产生的奶安全可靠吗？ ______ ．理由是 ______ ．
              难度：较易
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            • 4．
              哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成．如图为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图（N表示染色体组）．据图分析，下列有关叙述错误的是（　　）
              A．次级卵母细胞形成的过程需要激素调节
              B．细胞Ⅲ只有在精子的作用下才能形成成熟卵子
              C．细胞Ⅱ和细胞Ⅲ在分裂后期染色体数目相同
              D．培育转基因动物常选择细胞Ⅰ作为受体细胞
              难度：较易
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            • 5．
              如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ表示三种限制酶．请据图回答：
              （1）从高表达人乳铁蛋白的组织细胞中提取mRNA，通过 ______ 过程获得cDNA，用于PCR扩增．
              （2）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 ______ 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因．筛选含有重组载体的大肠杆菌，首先需要在含 ______ 的培养基上进行．
              （3）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 ______ （填字母代号）．
              A．启动子       B．tetR        C．复制原点       D．ampR
              （4）过程①可采用的操作方法是 ______ 法．进行过程②之前，需用相应的激素处理代孕牛，使其处于 ______ 状态．
              （5）对早期胚胎进行切割，可获得多个新个体，该种生殖方式是 ______ ．
              （6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 ______ 技术．
              难度：较易
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            • 6．
              如图是转基因抗盐马铃薯的培育过程，请据图回答：

              （1）为获取抗盐基因，可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的 ______ 来合成cDNA．利用PCR技术可在体外获得大量抗盐基因，该技术需要有一段已知抗盐基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 ______ ；扩增过程需要加入 ______ 酶．
              （2）构建基因表达载体时，为了防止含目的基因的外源DNA片段和质粒自身环化，最好选用图中限制酶 ______ 对它们进行切割．构建重组质粒时，还要在抗盐基因前面加上 ______ ，它是RNA聚合酶识别和结合部位，有了它才能驱动基因转录．
              （3）构建基因表达载体时，应将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的 ______ 上．为了促进农杆菌吸收基因表达载体，可用 ______ 处理农杆菌，使其处于感受态．
              （4）若要从个体水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功，采用的方法是 ______ ．
              难度：较易
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            • 7．

              应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题。

              (1)要使人的生长激素基因在牛的垂体细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、_________、__________________、标记基因等部分.在③之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入人生长激素基因,宜采用_________________技术.③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用______           _____技术,培育出多头相同的转基因牛犊。

              (2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅰ最可能是___________细胞,Ⅱ代表的细胞具有____              ________的特点.

              (3)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，则与采用叶肉细胞相比较，其优点是_______________________________，⑤过程采用的技术是___________________________。科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，将出现不抗虫的植株，此现象来源于_______________。

              难度：较难
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            • 8． 因工中用修饰改造基因工具（　　）
              A．限制酶和DNA连接酶
              B．限制酶和DNA水解酶
              C．限制酶和运载体
              D．DNA连接酶和运载体
              难度：中等
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            • 9． 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：

              (1) 获取外源基因用到的工具酶是　　 ，为了提高实验成功率，通常利用            技术获得大量标记的外源基因。

              (2) 外源基因能够整合到精子的           上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的            才能进入卵细胞中。

              (3) 过程②采用的是             技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行          处理。

              (4) 过程③需要在            (至少写出两点) 等条件下进行培养。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的              。

              (5) 为了获得更多的早期胚胎，常用                  激素对供体进行处理，使其                   ，从而获得更多的卵母细胞。

              难度：中等
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            • 10． 下列关于基因工程的叙述中，错误的是（　　）
              A．基因工程常用的运载体包括细菌的质粒、噬菌体、动植物病毒
              B．将目的基因导入大肠杆菌最常用的方法是用Ca2+处理细胞
              C．转基因羊在培育过程中还用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术
              D．基因治疗是把有基因缺陷的细胞中的缺陷基因剔除后再导入健康的外源基因
              难度：较易
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