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            • 1. 阅读如下材料,回答相关问题:
              材料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”.
              材料乙:科学家取免疫后小鼠的B淋巴细胞,并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中,再用一定手段诱导细胞整合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌特定抗体的杂交瘤细胞.
              材料丙:科学家将HIV的某蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生可与此蛋白结合的相应分泌蛋白,该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV.
              (1)材料甲属于 ______ 工程的范畴.将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 ______ 法.
              (2)材料乙属于 ______ 工程的范畴.诱导细胞整合常用的化学试剂是 ______
              (3)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可选提取HIV中的 ______ ,以其作为模板,在 ______ 的作用下合成DNA,从中获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞.从受体细胞中分享纯化出目的蛋白,该蛋白作为 ______ 注入机体后,刺激机体产生的相应分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是 ______
              (4)畜牧业生产上常利用胚胎工程相关技术对优良品种的牛羊等进行快速繁殖,以满足生产需求.据此回答下列问题:胚胎移植操作中,对供体和受体母畜通过 ______ 处理,使其生理状况相同;通过冲卵收集到的胚胎一般应处于 ______ 阶段;对收集到的胚胎,利用胚胎分割技术可提高优质胚胎的利用率.
            • 2. 如表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的而不重复标注.请回答下列问题.
              限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ
              识别序列及切割位点

              (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用限制酶为 ______ ,酶切后的载体和目的基因片段通过 ______ 酶作用后获得重组质粒.
              (2)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端可直接被DNA连接酶连接,原因是 ______ ,这两种酶 ______ (选填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开连接的部位,原因是 ______
              (3)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得 ______ 种大小不同的DNA片段.
              (4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加 ______ ,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中 ______
            • 3. 科学家从某细菌中提取抗冻基因,转入番茄并培育出抗冻番茄.如图是转抗冻基因番茄的培育过程,含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点.分析回答问题:
              (1)若要获得抗冻基因,可以从细菌中提取;也可以通过分析抗冻蛋白的 ______ 序列推测基因的结构,进而人工合成抗冻基因.对获得的抗冻基因可用 ______ 技术进行扩增.
              (2)上述两种途径获得的抗冻基因 ______ (填“是”或“否”)一定相同,原因是 ______
              (3)用图中的质粒和抗冻基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是 ______ .图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用 ______ 酶对外源DNA、质粒进行切割.
              (4)图中过程⑤表示 ______
            • 4. 回答下列有关现代生物科技方面的问题:
              (1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生 ______ 末端.若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,一般选择能使二者产生 ______ (相同、不同)黏性末端的限制酶.
              (2)若要获取转基因植物人工种子,需培养到 ______ 阶段,再进行人工种皮的包裹;如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产,培养到 ______ 阶段即可.
              (3)动物克隆技术:目前动物的克隆主要采用 ______ 技术来实现,我国禁止生殖性克隆,但不反对 ______ 的研究.
              (4)在精卵结合过程中,防止多精入卵的第一道和第二道屏障依次是 ______ ______
              (5)生态经济:使一个系统产出的污染物,能够成为本系统或另一个系统的 ______ ,从而实现废弃物的资源化.“无废弃物农业”体现了生态工程的 ______ 原理.
            • 5. 请回答下列与基因工程、胚胎工程、生态工程有关的生物学问题:
              (1)基因工程技术中获得目的基因后,利用PCR技术将该基因扩增,前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成 ______ .PCR技术中需要的关键酶是 ______
              (2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法,农杆菌的作用是 ______ .我国培育的转基因抗虫棉发展迅猛,请写出分子水平检测抗虫棉基因是否表达的方法 ______
              (3)体外受精是胚胎工程的重要环节,来自母方的卵母细胞要在输卵管内进一步成熟,达到 ______ 时期,才具备与精子受精的能力.胚胎移植是胚胎工程最后一道工序,其重要意义是 ______
              (4)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成无废弃物农业,这主要遵循了生态工程 ______ 的原理.我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种植灌木和草,却被硬性种植了属于乔木的杨树,结果许多杨树长得半死不活,防护林成为残败的“灰色长城”.其失败的原因主要是违背了 ______ 原理.
            • 6. 毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

              (1)过程①中最常用的运载工具是 ______ ,所需要的酶是限制酶和 ______
              (2)在过程②中,用 ______ 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是 ______
              (3)在过成③中,用 ______ 处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 ______ 处理.
              (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
            • 7. 肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌.研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制.该基因工程技术基本流程如图1.

              请回答:
              (1)进行过程①时,需用 ______ 酶切开载体以插入let-7基因.载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let-7基因转录,该部位称为 ______
              (2)进行过程②时,需用 ______ 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养.
              (3)研究发现,let-7基因能影响RAS的表达,其影响机理如图2.据图分析,可从细胞提取 ______ 进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录.肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中 ______ (RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的.
            • 8. 如图是利用生物工程技术生产人生长激素的示意图.质粒上的Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因,限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同.据图回答:
              (1)将人生长激素基因导入小鼠体内来生产生长激素.图中对供体雌鼠甲用促性腺激素处理一段时间后与雄鼠乙交配,然后通过手术的方法从雌鼠甲的 ______ 中取出受精卵.
              (2)①过程不能利用人的皮肤细胞,其原因是 ______ .②过程是在 ______ 酶的催化下,以 ______ 为原料合成相应产物.
              (3)从该生产过程看,为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选,切割质粒时应选用的酶是 ______
              (4)大肠杆菌细胞内应不含 ______ 基因,以利于筛选出含重组质粒的受体菌.
              (5)如果从限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ任选两种酶对质粒进行切割,均会将质粒切成两段,则形成的DNA片段有 ______ 种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占 ______
            • 9. 生物学家通过转基因体细胞克隆技术获得转基因牛,以便通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白.请回答下列问题:
              (1)请完善主要步骤:从人的 ______ 获得目的基因;构建含目的基因的表达载体;然后把基因表达载体导入牛的受精卵,目前最有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是 ______
              (2)目的基因的检测与鉴定分三个层次.若要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因及目的基因是否转录出了mRNA,检测方法是 ______ ,若要检测目的基因是否翻译成蛋白质,检测方法是 ______
            • 10. 根据现代生物技术知识回答:
              (1)“试管婴儿技术”不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会,也为人类的优生优育开辟了新的途径.在体外受精时,精子首先要进行 ______ 处理;卵母细胞则要培养到 ______ 期才能与精子结合.如果滥用试管婴儿技术设计婴儿性别,将会破坏人类正常的 ______
              (2)用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞,原因是10代以内的细胞一般能保持 ______ ,可以保证供体细胞正常的遗传基础.
              (3)应用修复技术治理镉污染的土壤,可以进行植物修复.常选择种植菊芋等耐镉植物,这体现了生态工程的 ______ 原理.植物中积累的镉会通过 ______ 的富集作用造成危害,所以不能用修复地的植物饲喂动物.
              (4)利用基因工程技术可使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”,如建立生产生长激素的乳腺生物反应器.科学家将生长激素基因和牛乳腺蛋白基因的 ______ 、终止子、标记基因等重组在一起,构建成基因的表达载体,并通过 ______ 方法导入牛的受精卵中.
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