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            • 1. 草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡.但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长.目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦.
              取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是否成功还未知.图1为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点.据图回答下列问题:
              限制酶MspⅠBamHⅠMboⅠSmpⅠ
              酶切位点C↓CGG
              GGC↑C
              G↓GATCC
              CCTAG↑G
              ↓GATC
              CTAG↑
              CCC↓GGG
              GGG↑CCC
              (1)若A﹣C浇清水,D﹣F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是 
              (2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入 
              (3)一个完整的基因表达载体除了具备复制原点、启动子和终止子外,还应包括 和 
              (4)若需利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是 和 
              (5)通常用 法将EPSPS基因导入植物体内.假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因 
            • 2. 在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长.下图为获得抗虫棉的技术流程.请据图回答

              (1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、 、将目的基因导入受体细胞、 
              (2)A过程需要的酶有 和 
              (3)在基因工程中,基因表达载体的构建非常关键,对表达载体的要求是必需具有启动子、 、 等条件.
              (3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入
            • 3. 如图为培育转基因山羊生产人β一酪蛋白的流程图.

              请回答下列问题:
              (1)获取过程①所用的人β一酪蛋白基因时,可先提取人体细胞中的 ,以其作为模板在 的作用下合成 .
              (2)重组人β一酪蛋白基因表达载体中必须有启动子, 是识别和结合的部位.
              (3)过程②可选用阶段的胚胎进行移植.
              (4)过程③可使用技术扩大转基因山羊群体,除此之外,还可以采取的措施有(答出一点即可).
              (5)过程④人β一酪蛋白基因在细胞内表达的场所为 .
            • 4. 人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL﹣2).该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解.研究人员将1L﹣2基因与人血清白蛋白(HAS)基因拼接成一个融合基因,并在酵母菌中表达,获得具有1L﹣2生理功能、且不易降解的1L﹣2﹣HSA融合蛋白,其技术流程如图.请回答:
              (1)图中③过程的模板是 .表达载体1中的位点 应为限制酶Bg1Ⅱ的识别位点,才能成功构建表达载体2.
              (2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与1L﹣2蛋白对应的碱基序列不能含有 ,才能成功表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白.启动子是 识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA.
              (3)培养人外周血单核细胞时,需要将温度控制在 ℃,此外还需要通入 (气体).
              (4)应用技术可检测酵母菌是否表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白.
              (5)如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞,经胚胎培养后移入受体母牛子宫内可以存活的生理学基础是 
            • 5. 中科院动物研究所小组已培育出中国首例转基因猕猴.这一研究成果标志着中国科学家在灵长类转基因动物研究方面达到世界领先水平.如图是转基因猕猴培育过程示意图,据图回答.
              (1)过程②中常用 技术将目的基因导入受精卵.
              (2)如果⑤过程在体外进行,那么卵母细胞需要培养到 ,精子需要获能.受精过程中精子头部接触卵细胞膜时产生 反应,以防止多精入卵.
              (3)在体外培养受精卵时,为了维持无菌、无毒环境,定期向培养液添加 .受精卵发育到 时期,开始分化,该时期 属于胚胎干细胞.
              (4)图中⑦过程称为 ,为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同,此前需对代孕雌猴做 处理.
            • 6. 内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,它有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用.研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系.内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应.ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实验ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等尊定基础.其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为CTCGAG).请分析回答:

              (1)完成过程①需要的酶是 ;与过程②相比,过程①特有的碱基配对方式是 
              (2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA;使 键断开,形成的黏性末端是 .用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是 
              (3)过程⑥中,要用 预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态.
              (4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是 
              (5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加.美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,试解释:
            • 7. 观察某转基因抗虫棉品种多代种植的性状变化,发现其中的矮杄变异株.经过连续自交获得矮杄性状表现稳定的突变体.用正常植株与矮杄突变体进行杂交,F2结果见表1.在苗期用赤霉素(GA3)处理,并测量其株高,结果见表2.

              请回答问题:
              (1)利用 的方法将苏云金杄菌的杀虫晶体蛋白质基因导入普通植株,获得转基因抗虫品种.为确认矮杄突变体是否携带外源杀虫晶体蛋白基因,可利用 技术进行检测.
              (2)根据表中数据判断,矮杄是 性性状;如果该矮杄性状是由两对等位基因控制,其传递 (符合/不符合)基因的自由组合定律.
              (3)矮杄性状 (是/不是)由于插入T﹣DNA引起的,判断的依据是 
              (4)由表2结果可知,用GA3处理后,植株高度 ,原因是赤霉素有 的作用,同时说明矮化植株体内的赤霉素信号传导途径 (正常/异常),推测造成其矮化的原因可能是 ,这需要通过测定 来验证.
               
            • 8. HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体.回答下列问题:
              (1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的 ,以其作为模板,在 的作用下合成 .获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞.
              (2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是 .该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是 
              (3)科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,制作出了早早孕试纸.要获得人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,需要先将 注射到小鼠体内,培养一段时间之后,将从小鼠的脾脏中提取出的 和小鼠的骨髓瘤细胞融合,获得
            • 9. 通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物.运用这一技术可使羊奶中含有人体蛋白质,如图表示了这一技术的基本过程.在该过程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是﹣GGATCC﹣,请回答:
              (1)从羊染色体DNA中“剪下”羊蛋白质基因的酶是 .人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中时需要的酶是 .
              (2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图.
              ﹣GGATCC﹣
              ﹣→

              (3)人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内,原因是 ,“插入”时常用的工具是 
              (4)这里“表达”的含义是 .
              (5)你认为此类羊产生的奶安全可靠吗?理由是什么? 
            • 10. 据图回答有关基因工程的问题:
              (1)图中正在构建基因表达载体,构建时所需的工具酶有  和 
              (2)一个完整的基因表达载体包括四部分,分别是启动子、  、 .
              (3)启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,它是 识别与结合的位点,促进转录的开始.
              (4)如果要将此表达载体导入大肠杆菌细胞中,通常要用 对大肠杆菌处理,使之变成 细胞.该细胞的特性是 
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