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            • 1． 现代生物技术与疾病治疗
              1990年，科学家首次用基因治疗手段成功治疗了一位因为缺乏正常的腺苷脱氨酶（ADA）基因而导致严重复合免疫缺陷症（SCID）的患者，治疗思路是将正常的ADA基因转入患者血液中的T细胞，再回输至患者体内。主要的治疗过程如图。

              （1）图中虚线圈内所示的过程是转基因技术步骤中的______。
              A．获取目的基因
              B．目的基因与运载体重组
              C．重组DNA分子导入受体细胞
              D．筛选含目的基因的受体细胞
              （2）下列有关SCID患者基因治疗的叙述正确的是______。（多选）
              A．选用感染率高且对人体无毒性的病毒能提高此基因治疗的成功率
              B．T细胞1是受体细胞，获得T细胞2无需经过筛选
              C．T细胞2的大量增殖需采用动物组织和细胞培养技术
              D．若要根治此病，宜选用造血干细胞作为受体细胞
              （3）上述基因治疗方法与一般的异体移植相比，最大的优点是______。
              （4）若如图患者为某种肿瘤患者，给T细胞1成功转入识别该种肿瘤细胞的受体基因后得到T细胞2。
              ①与T细胞1相比，T细胞2在细胞膜物质组成上的变化和功能上的变化分别是______。
              ②由此引发的免疫反应属于______。（多选）
              A．第2道防线   B．细胞免疫  C．天然免疫   D．特异性免疫
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            • 2． 从自然界中的生物体内分离得到的天然酶，在工业生产环境中催化效率往往较低。科研人员通过如图所示的流程改造天然酶，已改进酶的功能。对这一改造过程的分析，不合理的是（　　）
              A．①过程产生的基因突变是随机的
              B．②过程中受体菌应处理为感受态
              C．③过程筛选突变酶依赖于抗生素
              D．多次重复循环导致酶的定向进化
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            • 3． 运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt毒蛋白基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能减轻菜青虫对油菜的危害。下列叙述错误的是（　　）
              A．转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt毒蛋白基因
              B．目的基因的受体细胞可以是油菜受精卵，也可以是体细胞
              C．转基因抗虫油菜的种植过程中减少了农药等的使用量，降低了生产成本
              D．转基因抗虫油菜种植时，菜青虫不会产生抗性，这样可以彻底消灭菜青虫
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            • 4． 中国科学院神经科学研究所的三个研究团队经过三年努力，利用基因编辑技术（ CRISPR/Cas9），敲除了体外受精猴胚胎中的生物节律核心基因BMAL1，产生了一批BMAL1基因缺失的猕猴。并利用克隆技术，首次成功构建了一批遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴模型。目前这些猕猴具有昼夜活动紊乱、睡眠障碍、焦虑和精神分裂症等表型这为模拟人的节律紊乱相关疾病迈出了关键的一步。回答以下问题：
              （1）新一代基因编辑工具由Cas9和向导RNA（一段能特异性引导Cas9到靶序列处的RNA）构成。该复合体能与DNA分子上的特定序列结合，并在合适位点切断DNA双链，由此可知Cas9属于基因工程中的______酶，切开的是______键。一般来说，在使用基因编辑工具对不同DNA进行编辑时，应使用Cas9和______（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因的相关编辑。
              （2）从分子水平上分析，科研人员可采用______技术检测是否成功的敲除了猕猴的BMAL1基因。
              （3）体细胞克隆猴过程中涉及到的生物工程技术有______（至少答三点）。
              （4）选猕猴做实验对象的优点很多，例如：猕猴除了具有昼行性这一特性外，在______上与人类高度相似，可以用来研究脑疾病和高级认知功能。
              （5）上述成果表明我国正式开启了批量化、标准化创建疾病克隆猴模型的新时代，这有助于一些重大疾病早期诊断与干预，缩短药物______，提高药物研发成功率，加快我国新药创制与研发的进程。
              （6）在试验中，基因编辑技术（ CRISPR/Cas9）有很高的概率会“脱靶”。谈谈你对中国首例“基因编辑婴儿”诞生的看法______。
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            • 5． 噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的编码基因插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随噬菌体外壳蛋白基因的表达而表达，同时，外源蛋白或多肽随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。利用该技术可以获得单克隆抗体（最新技术）。请问答下列问题：
              （1）传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行______处理，整个过程中涉及的现代科学技术有______（答出两项即可）。
              （2）限制酶是基因工程常用的三大工具之一，此类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，请推测它在原核生物中的作用是：______。
              （3）为了得到大量的外源蛋白基因，可使用PCR技术进行体外扩增，合成引物______（填“需要”或“不需要”）知道整个外源DNA序列。
              （4）为了扩增重组噬菌体的数量，你觉得应该如何操作？______。
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            • 6． PD-1是由PD-1基因（凋亡基因）指导合成的位于淋巴T细胞表面的蛋白质；PD-L1是一些肿瘤细胞表面的蛋白质。PD-1和PD-L1之间相互作用，促进T细胞凋亡，则癌细胞可逃脱免疫系统的追杀。使用PD-1抗体治疗癌症取得很好的效果。就相关信息回答以下问题：
              （1）利用基因工程技术生产PD-1，构建的基因表达载体必需具有PD-1基因以及______。对PD-1进行检测采用的是______法。
              （2）如果用小白鼠来生产纯度高、特异性强的PD-1抗体，可以将______注射到小白鼠体内，然后从其脾脏中获得______细胞并与小白鼠的______细胞在______作用下形成杂交瘤细胞。最终选择______的杂交瘤细胞进行体内或体外培养。
              （3）根据上面信息，写出PD-1抗体治疗癌症的机理：______。
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            • 7． SOD是一种抗氧化酶，它能催化O2形成H2O2增强植物的抗逆性。如图为培育农作物新品种的一种方式。以下叙述正确的是（　　）
              A．该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性
              B．①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞
              C．②、③分别表示脱分化、再分化过程，均无需严格的无菌操作就可以完成
              D．利用植物组织培养生产SOD时，必须选取茎尖或叶尖细胞进行培养
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            • 8． 下列对科学探究及所用方法的叙述，错误的是（　　）
              A．萨顿通过类比推理得出基因在染色体上
              B．我国科学家利用基因工程培育出抗虫棉
              C．斯他林和贝利斯通过切除法发现促胰液素
              D．通过荧光染料标记研究膜蛋白质的流动性
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            • 9． 花椰菜易被黑腐病菌侵染而患黑腐病，而野生黑芥具有抗黑腐病的抗性基因。请回答下列有关问题：
              （1）利用基因工程技术可获得抗黑腐病的转基因花椰菜植株。在此过程中，常借助______法将野生黑芥的抗黑腐病基因导入花椰菜细胞；还要利用______技术将含抗黑腐病基因的花椰菜细胞培育成转基因植株。要确定抗黑腐病基因导入花椰菜细胞后，是否赋予了花椰菜抗病特性，需要在个体生物学水平上做______实验。
              （2）利用植物体细胞杂交技术可获得抗黑腐病的杂种植株。在此过程中，制备花椰菜和野生黑芥的原生质体时需要用到的酶是______；进行花椰菜和野生黑芥原生质体间的融合时，常使用的诱导剂是______。花椰菜和野生黑芥原生质体的融合过程利用了细胞膜的______。
              （3）黑芥是云南脍炙人口、驰名中外的土特产品，某人为了取得较大的经济效益，在某地区大面积单一种植了黑芥，由于病虫害增加，环境恶化，最终导致该片黑芥全部死亡，这是因为该黑芥种植区违背了生态工程中的______原理，导致生态系统的______稳定性较低。
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            • 10． 单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。如图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。下列叙述不正确的是（　　）
              A．可以利用光学显微镜检测某人是否患镰刀型细胞贫血症
              B．根据凝胶电泳带谱分析四个孩子中基因型纯合的是Ⅱ1和Ⅱ4
              C．检测突变基因转录的RNA分子，其核糖核苷酸序列为（-UGCACAA-）
              D．将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以达到治疗的目的
              难度：中等
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