6.
为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种.
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,从陆地棉和拟南芥的
中获取酶D基因和转运肽基因,所含三种限制酶(ClaI、SacI、XbaI)的切点如图所示.则用
和
酶处理两个基因后,可得到
端与
端(填图中字母)相连的融合基因.
(2)将上述融合基因插入如图所示Ti质粒的T-DNA中,构建
并导入农杆菌中.将获得的农杆菌接种在含
的固体培养基上筛选培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的侵染液.
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是
.
(4)进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过植物组织培养技术,可培育成转基因油菜植株.用
法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功转录.