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            • 1. 请根据现代生物工程技术回答下列问题:
              (1)基因工程技术中对已获得的目的基因,常采用PCR技术大量扩增.该技术的基本过程是:目的基因DNA受热变性后解链为单链, ______ 与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶的作用下进行 ______ ,如此重复循环多次.
              (2)限制酶Smal能识别如图,并在图中箭头位置切断DNA.

              用限制酶Smal切割获取的目的基因需用 ______ 酶构建基因表达载体.
              (3)培育转基因小鼠除利用基因工程技术之外还需用到 ______ ______ 等技术.
              (4)制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术,使 ______ 细胞与 ______ 细胞融合,融合成功的细胞经过筛选就是所需要的 ______ 细胞.
            • 2. 科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠-人嵌合抗体,用于癌症治疗.如图表示形成鼠-人嵌合抗体的过程.请据图回答:

              (1)科学家改造抗体属于 ______ 工程的范畴,通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠-人嵌合抗体基因,然后导入到鼠淋巴细胞中,
              (2)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂 ______ 的作用下与 ______ 融合,融合后的细胞,用 ______ 筛选出 ______ ,在经过 ______ ,多次筛选,选出 ______
              (3)这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于 ______ ,可大量制备.用抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成“ ______ ”.
            • 3.

              白细胞介素-2(IL-2),在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。传统生产方法成本高、产量低,获得的IL-2在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题:

              (1)利用基因工程生产IL-2,过程是:

              ①从健康人体外周静脉血分离能合成IL-2的免疫细胞,从中提取________,经逆转录获取目的基因,此过程需要的原料是________。

              ②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成重组载体,该载体的化学本质是________。该步骤是基因操作的核心,称为________。

              ③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2处理,使其成为________,再在一定温度下完成转化。

              ④在培养液中培养一段时间后,经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用________技术。

              (2)利用蛋白质工程对IL-2进行改造,基本途径是:预期蛋白质功能→________→________→找到对应的脱氧核苷酸序列。

              (3)利用细胞工程生产IL-2,思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出________细胞,经细胞培养可获得大量IL-2。

            • 4. 微载体是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成的颗粒,其直径很小,将对细胞无害的微载体加入到培养容器的培养液中,作为载体,可使细胞在微载体表面附着生 长.微载体大规模细胞培养技术已广泛应用于科研生产,其流程图如图.请回答:

              (1)图中过程a是利用 ______ 处理动物组织,分散细胞.微载体加入培养罐中后,通过搅动使其保持悬浮状态,便于细胞的 ______ ,所以选用的微载体颗粒直径应尽可能小.
              (2)图中利用培养罐进行动物细胞的体外培养所需的条件是 ______ 的环境、营养、温度和pH、 ______
              (3)图中制备单克隆抗体的过程中,应先用 ______ 进行筛选出 ______ 特点)的杂交瘤细胞,然后培养.
              (4)利用基因工程可以产生干扰素,可以通过 ______ 技术,将重组DNA分子导入哺乳动物的 ______ 中,并送入母体,使其发育成转基因动物.
            • 5. 生物工程在医疗卫生方面得到了广泛应用,请回答下列问题.
              (1)利用 ______ 技术制备的杂交瘤细胞,可用于制备单克隆抗体.与体内抗体相比,单克隆抗体具有理化性质单一、 ______ 、可大量制备等优点.
              (2)干扰素、胰岛素等物质可以通过工程菌来大量生产.该技术中目的基因和运载体要用同种 ______ 切割,以产生相同的 ______
              (3)在完成体外受精的过程中,对已取得的精子要进行 ______ 处理,为了获取更多的卵细胞,一般要对雌性个体注射 ______ ,使其超数排卵.
              (4)利用细胞培养技术可以获取自身健康的皮肤,用于皮肤移植.在此过程中通入CO2的目的是 ______ ,在培养液中加入 ______ 酶,可防止细胞出现接触抑制现象.
            • 6. 近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势.狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消灭狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据.我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果.
              请根据上述材料,回答下列问题:
              (1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病,制成减毒活疫苗需要用 ______ 培养.
              (2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备.在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是 ______
              (3)如图所示是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              ①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是 ______ 细胞,该细胞能够产生 ______ .从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是 ______
              ②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的 ______ 、聚乙二醇或电激等诱导.
              (4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有 ______
            • 7. 回答下列问题:
              如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:
              (1)OA段的培养称为 ______ 培养,AB段可能发生了 ______ 现象,需要用 ______ 酶处理,以使组织细胞分散开来.
              (2)为制备单克隆抗体,需将 ______ 注射到小鼠体内,以此获取 ______ 细胞,同时可选取图中 ______ 点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选取细胞的细胞膜上的 ______ 比正常细胞显著减少.
              (3)为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交细胞,可用 ______ 培养基达到目的.杂交瘤细胞具有 ______ (特点)
            • 8. 手足口病是五岁以下儿童中常见的传染性疾病.柯萨奇病毒A16型(CA16)和肠道病毒71型(EV71)是引起手足口病的两个最主要的病原体,感染EV71或CA16都有可能引起严重的神经系统并发症甚至导致死亡.可利用生物技术手段制备手足口病疫苗,请根据所学知识分析回答下列相关问题:
              (1)为获得大量手足口病的抗体,可将 ______ 细胞与 ______ 细胞进行细胞融合,最常用的诱导融合手段是 ______ .至少经过 ______ 次筛选后获得的杂交瘤细胞,可通过 ______ ______ 生产大量抗体.这种方法获得的抗体具有 ______ ______ ______ 的优点.若得到的抗体不易保存,可通过 ______ 工程对天然抗体进行改造,使其满足人类需要.
              (2)科学家研制手足口病基因疫苗的基本过程为:获取病毒某基因后,与 ______ 结合形成的表达载体还必须具备 ______ ______ ______ 等;注入机体基因表达后,产生病毒的 ______ (填“抗体”或“抗原”),从而使机体对该病毒产生免疫.
            • 9. 如图表示基因型为AaBb的二倍体玉米植株的四种培育过程,从上到下依次为A、B、C、D过程,请据图回答下面的问题.
              (1)A过程中获得单倍体植株的方法是 ______ ,在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常会发生 ______ 变化.因此还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选.
              (2)单倍体植株产生的途径有两条,一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株.另一种是花粉通过 ______ 阶段发有成植株,这两种发育途径的差别主要取决于培养基中 ______ .花粉发育过程中,一般来说在 ______ 期,花药培养成功率最高.
              (3)A过程中,该植株的一个小孢子母细胞形成的四个小孢子的基因型为 ______
              (4)A、B、C、D四种过程中,过程 ______ 需配制MS培养基,其制备过程为:配制 ______ →配制培养基→灭菌.
              (5)细胞壁阻碍原生质体融合,D过程中,离体植物细胞需要在温和条件下用 ______ 分解细胞壁获得原生质体.
            • 10.

              请阅读下列材料并回答:

              材料一 由于细胞的密度不同,在地面上受重力影响,细胞的融合非常困难,在太空进行此试验比在地面试验细胞融合率大大提高。“神舟”六号飞船上进行了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、黄花烟草原生质体和“革新”一号烟草原生质体的融合两个科学实验,在电融合仪内经过l60min后,终于获得成功。

              材料二图为哺乳动物生殖过程及相关细胞工程的示意图,其中b为卵细胞,c、d为体细胞。


              (1)细胞融合技术与传统的有性杂交相比,其优越性在于______________________________  。在太空进行细胞融合与在地面进行细胞融合相比,其优越性在于______________________________。 (2)利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造 ______________________________开辟了新的途径。

              (3)动物个体甲、乙的产生分别属于______________________________生殖和______________________________生殖。

              (4)在“神舟”六号飞船上举行的“太空融合”,与上图中的方法______________________________的原理相同。

              (5)人工诱导动物细胞融合与诱导植物细胞融合的方法相同的是都可用物理方法和化学方法,此外动物细胞融合还可用        作为诱导剂。根据上述材料,你认为在神舟六号上所用的诱导方法是       。

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