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            • 1. 人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体.已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原.疫苗生产和抗体制备的流程如图:

              (1)过程①代表的是    
              (2)在将X进行扩大培养之前,至少需要经过两次筛选,方法分别是用        
              (3)以实验操作过程中用到的技术有    
              (4)在给小鼠皮下注射A蛋白时,要重复注射几次的目的是    
              (5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的    来制备疫苗.对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较,或用图中的    与分离出的病毒进行特异性检测.
            • 2. 如图是通过生物技术制备单克隆抗体的两种途径,请分析回答下列问题:

              (1)在获取抗体之前,需要向健康小鼠注射特定抗原(如乙肝疫苗),图中细胞A在小鼠体内主要参与    免疫过程.
              (2)过程①采用的诱导融合方法是    ,依据的生物学原理是    .过程④需要用的酶是    
              (3)在结构甲中,氨苄青霉素抗性基因的作用是    ,启动子的作用是    
              (4)抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同,两者的生物活性    (填“相同”或“不相同”),原因是    
            • 3. 如图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程.请回答下列问题:

              (1)细胞A的形成过程中最常用的诱导因素是    
              (2)在I图制备单克隆抗体的过程中,包括    两个过程.经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行    ,经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞,进行体内或体外培养.
              (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越性是    
              (4)Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植,体外受精前,需要对奶牛的精子进行    处理.受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和    反应.进行早期胚胎的体外培养和进行胚胎移植,胚胎培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加    和动物血清.胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活,其生理基础是    
              (5)一般情况下,良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足,请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法    .若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛,可对Ⅱ中囊胚进行,操作过程需要特别注意的问题是    
            • 4. 人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断.如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答下列问题.

              (1)制备单克隆抗体过程中要用到        技术.
              (2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于    ,使小鼠产生能分泌相应    的淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的    免疫.
              (3)在细胞内DNA合成一般有两条途径.主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径.另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径.
              ①利用两条DNA合成途径的不同特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的    成分具有筛选杂交瘤细胞的作用.
              ②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是    
              (4)此过程生产的单克隆抗体可以与    特异性结合,从而诊断早孕.
            • 5. 埃博拉病毒(EBO)圼纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋内棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识別.
              (1)基因疫苗指的是DNA疫苗,耍获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA    ,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用    技术.
              (2)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的    细胞与鼠的瘤细胞进行杂交,筛选后进一歩培养的是    细胞,此细胞的特点是    .可以用其产生的抗体与药物制成“生物导弹”,抗击埃博拉病毒(册(EBO).
              (3)为了从分泌乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性农达的    .当其与    识别和结合,才能驱动转录过程,最终翮译成功.
              (4)为了提商胚胎利叫率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的    进行操作.从分子水平检测转基因牛足否培育成功可以通过    技术.
            • 6. 如图所示为细胞融合技术的一些过程,请据图回答:

              (1)若A、B细胞为植物细胞,在细胞融合前,可先用    酶除去细胞壁,余下的部分称为    ;杂种细胞形成的标志是    ,则形成的D细胞还要通过植物组织培养的    过程培育成杂种植株.
              (2)若A、B细胞为动物细胞,一般取自幼龄动物组织或胚胎,然后用    处理使其分散开来;动物细胞体外培养需要满足的条件有        、合适的营养、一定的气体环境等.其中C02的主要作用是    
              (3)若该过程是制备单克隆抗体,诱导细胞融合的方法除了电激等物理方法外还包括    ;融合的细胞包括    .单克隆抗体最主要的优点在于    
            • 7. 某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图所示.

              若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入诱导剂诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞.
              回答下列问题:
              (1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过    次免疫后才能有符合要求的.达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是    小鼠,理由是    
              (2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有    ,体系中出现多种类型细胞的原因是    
              (3)杂交瘤细胞中有    个细胞核,染色体数目最多是    条.
              (4)在进行细胞培养时,会发现细胞贴附在瓶上,称为    
            • 8. 图为利用生物技术获得转基因猪和转基因烟草的过程(图中数字表示过程或技术,字母表示物质或结构),据图回答:

              (1)为分离提纯苏云金芽孢杆菌,先用    培养基进行扩大培养,再用    方法进行分离,获得一个个单独的    
              (2)在研究过程中,采用    技术对目的基因进行扩增,然后将目的基因与质粒等载体结合形成了重组质粒.在重组质粒的构建过程中需要的工具酶有    
              (3)图中②代表     技术.若培养C中的ES细胞,一般在培养皿底部制备一层 胚胎成纤维细胞,目的是    
              (4)若在0.5-0.6mol/L的    溶液环境下用特定的酶处理D,可获得原生质体.若将含有D的培养物放在摇床上,通过     培养可以分散成单细胞,这些单细胞具有     细胞的特征.
              (5)使用自然生长的烟草茎进行组织培养,需要依次在70%酒精和    溶液中浸泡消毒.各种器皿和培养基等通常用    法灭菌.
              (6)从经特定免疫处理的猪中提取B淋巴细胞,与     融合,形成杂交细胞,经筛选,克隆培养后,获得的单一细胞的特征是    
            • 9. 回答下列有关生物工程的问题.
              材料1抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两种合成途径的研究.下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图.

              普通质粒V1基因大肠杆菌免疫后的人体分离细胞AmRNA③结构甲抗体⑤细胞增殖抗体⑥Y细胞①②④
              (72)在获取抗体之前,需要向健康人体注射特定抗原(如乙肝疫苗),并且每隔一周重复注射一次.免疫学称细胞A为    ,该细胞在人体主要介导    免疫.
              (73过程①至②获取的抗体称为    ,其中①是    过程,Y细胞称为    
              材料2 上图中,结构甲的建构可用下图1和2表示.图1表示含有目的基因的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为如表所示.
              限制酶MspⅠBamHⅠMboⅠSmaⅠ
              识别序列及切割位点




              (1)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为            
              (2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子中分离出图1及对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有    种不同长度的DNA片段.
              (3)上述结构中的建构过程可知,在限制酶作用下得到的产物有多种,生产上多采用    技术来降低目的基因分离提取的难度,也有利于限制酶的回收和再利用.
              (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行拼接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是    .在导入重组质粒后,为了筛选出含有重组质粒的大肠杆菌,一般需要添加        (固体/液体)培养基进行培养.在培养前,培养基必须先经过灭菌,所用的方法是        ;采用    的方法接种以获得单菌落后继续筛选.
            • 10. 如图为制备抗寨卡病毒(一种RNA病毒)单克隆抗体过程示意图,请据图回答:

              (1)图中细胞①为    ,已知该细胞取自小鼠脾脏,据此推测,脾脏是该细胞接受抗原刺激并增殖分化为    主要场所之一.
              (2)过程②常用的物质是    ,过程④使用HAT    (填“选择”或“鉴别”)培养基对细胞进行筛选,由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存,故只有    细胞能长期存活.
              (3)利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗,第一步,用该病毒的核酸通过酶的    作用合成所需的DNA;第二步,用酶从DNA中    获得相关目的基因;第三步,目的基因与运载体拼接成重组DNA;最后将重组DNA导入细菌细胞中,这一步骤常用的方法是    
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