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            • 1.

              女性怀孕后会分泌一种糖蛋白——绒毛膜促性腺激素(HCG),尿液中会检出HCG的存在。用抗HCG单克隆抗体制备的试纸可以测试女性是否怀孕。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答:

              (1)制备单克隆抗体利用的生物学技术有______________和_____________。

              (2)促进动物细胞融合得到乙,常采用的方法有_________、________(答2个)。

              (3)用特定的选择培养基对乙筛选,得到的细胞丙的特点是_____________。

              (4)对丙检测筛选得到丁,采用的方法是__________。生产的单克隆抗体可以与__________特异性结合,从而诊断早孕。

              (5)将验孕试纸标有MAX标志线的一端插入待测尿液中(尿液不能没过该线),片刻后取出平放,若尿液中含有HCG,会随尿液向右扩散,与包埋在标志线右侧区域的被显色剂标记的抗HCG抗体1发生特异性结合,形成的复合体继续随尿液向右扩散至检测线处,又可以与固定在该区域的抗体2结合形成新的复合体,并不断积累,从而在此处显示出颜色。对照线区域固定着另外一种抗体3,可以捕获被显色剂标记的抗体1。因而当尿液继续扩散到对照线时,也会显示出颜色。

              据此判断:①若检测线和对照线均显示颜色,表示_________;

              ②若仅有对照线显示颜色,表示_______________;

              ③若检测线和对照线均不显示颜色,表示___________。

            • 2. Ⅰ、某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:
                (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其它培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量_______。
                (2)细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是_______。
                (3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长停止,这种现象叫_______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用_______消化处理。
                (4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的_______。

              Ⅱ、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。

              (1)该方案能达到预期效果吗?________。原因是__________________。

              (2)图中过程②中使用的特有诱导剂是______________。如果能成功获得理想的杂交瘤细胞,该细胞的特点是  ________________________(答两点)。

              (3)在制备破伤风杆菌抗体的过程中,进行了两次筛选,其目的不同,②是通过筛选获得__________,④是通过筛选获得___________________。

            • 3. 如图是制备分泌抗X(H1N1流感病毒)抗体的过程,根据图解回答问题:

              (1)给小鼠注射抗原的目的是__________________________________________   _______ 

              (2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有__________________的特性。

              (3)由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了_______  ________________________的动物细胞工程技术手段。

              (4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是还含有__________________________

              (5)在动物细胞融合过程中,需要将所选取的组织细胞分散开,以利于细胞融合,可用___________ ___处理离体组织细胞使之分散。

              (6)图中有两次筛选过程,其中步骤④的目的是筛选出____________________________,步骤⑤⑥的目的是筛选出__________________

              (7)请根据以下信息,设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加入聚乙二醇促融,获得杂种细胞。

              方法:______________________________________________________________________

              原理:____________________________________________________________________  _____

            • 4. 利用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是(  )
              A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体
              B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
              C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
              D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
            • 5.

              随着妊娠年龄的增加,21一三体的发病风险在不断增加.需要进行产前诊断来预防患病孩子的产生。常用的方法有:

                (1)唐氏筛查:抽取孕妇血液化验,检测血清中的甲型胎儿蛋白、绒毛膜促性腺激素等指标。检测这些物质可用__________技术,以细胞工程技术生产的、纯度高的_____________为试剂进行检测,筛查出的高危孕妇还需要进一步检查鉴定。

                (2)羊水检查:胎儿的某些细胞会脱落在羊水中,通过羊水穿刺,可以得到胎儿的细胞。将这些细胞通过___________技术以扩大细胞的数量,选择______的细胞进行染色体核型分析,了解胎儿细胞染色体的结构和___________是否正常。

                (3)无创基因检测:在孕妇的血液中存在胎儿游离DNA片段,可以对21号染色体上的特有基因DSCR3和非21号染色体上的基因GAPDH(做参照)进行实时荧光定量PCR扩增,以测定DSCR3基因和GAPDH基因的含量,计算2种基因剂量的比值。如:

               

              样品数

              DSCR3/GAPDH

              正常人

              80

              0.884±0.420

              21-三体胎儿

              5

              1.867±0.054

              21-三体患者

              7

              1.810±0.169

                要利用胎儿游离的DNA片段扩增出相应的基因,关键是_________的设计。从上述表格看,正常人与21-三体患者的比值有差异,其主要原因是____________利用该技术筛查21-三体的胎儿是否可靠,请说明理由:_____________。

            • 6.

              下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程;图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题:

              (1) 图1所示过程所用的生物技术有         

              (2) 将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选:一次是通过           培养基,筛选出杂交瘤细胞,另一次是通过            检测,筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。

              (3) 通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别抗原X,其原因是该抗体具有                   的特点。

              (4) 图2中的重组细胞         (填“①”或“②”)实现了基因的重组。

              (5) 图2中的早期胚胎发育到         阶段才可以移植,在移植之前,需要进行质量检查,用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是                。

              (6) 为了获得多个基因型相同的优质奶牛,可采用的技术手段是         

            • 7.

              百菌清是一种杀菌剂,主要用于防治蔬菜,水果等经济作物。残留的百菌清可导致植物细胞发生遗传学突变,科学家研制出百菌清单克隆抗体可用于准确检测作物表面残留的微量百菌清,回答下列问题:

              (1)制备百菌清单克隆抗体时先要将百菌清作为抗原注入小鼠细胞中,下表表示免疫次数和抗体效价(每分子抗体能结合抗原的数量)之间的关系,若血清抗体效价需达到1:4000以上,则小鼠至少要经过____次免疫才能符合要求,其中最适合用于制备百菌清单克隆抗体的小鼠编号是_______。第一次免疫和第二次免疫时,小鼠体内能产生抗百菌清单克隆抗体的细胞分别是由_____________增殖分化形成的。

                         小鼠编号

              抗体效价       

              免疫次数

              A

              B

              C

              D

              E

              第一次

              1:1000

              1:1000

              1:1000

              1:1000

              1:1000

              第二次

              1:2000

              1:2500

              1:3600

              1:2200

              1:3000

              第三次

              1:4000

              1:4600

              1:8000

              1:5000

              1:4500

              (2)制备百菌清单克隆抗体过程中,所依据的生物学原理是______________,专一抗体检测阳性和克隆化培养的目的是__________________。

              (3)抗百菌清单克隆抗体能准确的检测作物表面微量的百菌清,这主要是因为单克隆抗体具有__________________________的优点。

              (4)小鼠骨髓瘤细胞和浆细胞融合一般可用PEG作为诱导剂,融合效果受pH的影响,某实验小组为了探究PEG诱导细胞融合的最适pH,在pH为1〜8之内设置了系列等梯度的pH,发现随着pH的上升,细胞融合的效果越来越好,请你做补充实验,以达到该实验小组的实验目的。

              ________ ___________________________________________________________________________

            • 8.

              [生物——选修3:现代生物科技专题]

              采用单克隆技术制备三聚氰胺特异性抗体,可用于检测乳制品中可能存在的微量三聚氰胺。然而由于三聚氰胺分子量过小,不足以激活高等动物的免疫系统,因此在制备抗体前必须对三聚氰胺分子进行有效“扩容”(如图)。

              (1)除蛋白质以外,也适合使三聚氰胺分子“扩容”为抗原分子的是__________(氨基酸、葡萄糖、多糖)。单克隆抗体的制备所基于的免疫学基本原理是______________________。

              (2)“扩容”的三聚氰胺复合物进入小鼠体内后,会被小鼠多种免疫细胞的__________所识别,进而产生相关免疫反应。该流程常常使用灭活的病毒,其作用是___________________。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但是并不破坏这些病原体的___________结构。

              (3)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_________中使其增殖,再从__________中提取、纯化获得。

              (4)高等哺乳动物先天性免疫和获得性免疫系统的代表性细胞类型分别是___________和_____________________。

            • 9.

              如图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。


              (1)该方案能达到预期效果吗?________。原因是______________________________________。

              (2)在制备破伤风杆菌抗体的过程中,进行了两次筛选,其目的不同,②是通过筛选获得________________,④是通过筛选获得____________________________________。

              (3)破伤风杆菌的抗体最终可从______________________和________________中提取。

            • 10.

              双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术(免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题:

              (1)过程①的目的是__________,制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的动物细胞工程技术有____________和__________________。

              (2)过程②诱导融合常用的化学方法是______________。经过过程③④得到的单克隆杂交瘤细胞应具备的特征是___________________。

              (3) 请根据所学知识,用箭头和文字在图中方框内补全获取单克隆杂交一杂交瘤细胞的生产过程。_____________________

              (4) 获得的单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外条件下培养或___________,均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。

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