①对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，放在－４℃的冰箱中保存

②土壤中的细菌之所以能分解尿素的根本原因是它们含有脲酶　

③分离纤维素分解菌的选择培养所用培养基为液体培养基　

④植物组织培养中，生长素与细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化、再分化的关键性激素

A．[生物技术实践]

淀粉分解菌是能分解淀粉的一类微生物，在自然条件下，淀粉分解菌和其他各种细菌混杂生活在土壤中。某实验小组利用培养基将土壤中的淀粉分解菌筛选出来，回答下列问题：

(1)将土壤中的淀粉分解菌筛选出来的培养基应添加________作为唯一的碳源，此外还需要添加的成分有___________________。

(2)稀释涂布平板法可用于微生物的接种和计数，该实验小组将样液分别稀释了10倍、10²倍、10³倍、10⁴倍，然后将10²倍、10³倍、10⁴倍的稀释液分别涂布在不同的平板上，涂布多个稀释倍数的稀释液的目的是____________________________________。若有三个平板均涂布了稀释倍数为10³倍的稀释液1mL，分别形成了68、70和72个菌落，则原样液体中每毫升含有淀粉分解菌________个，该方法测量值一般比实际值________。

(3)涂布一段时间后，待长出菌落后可向培养基中滴入________，挑取有明显淀粉分解圈的单菌落，一般来说，淀粉分解圈越大，则淀粉分解菌分解淀粉的能力越________。

B．[现代生物科技专题]

科学家从某细菌中提取抗冻基因，转入番茄并培育出抗冻番茄。下图是转抗冻基因番茄的培育过程，含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。分析回答问题：

​

(1)若要获得抗冻基因，可以从细菌中提取；也可以通过分析抗冻蛋白________的序列推测基因的结构，进而人工合成抗冻基因。对获得的抗冻基因可用________技术进行扩增。

(2)上述两种途径获得的抗冻基因________(填“是”或“否”)一定相同，原因是_____________________________________________。

(3)用图中的质粒和抗冻基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

(4)图中过程⑤表示______________________________________。

(1)微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及                   

(2)在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰，其目的是                    。

(3)某同学在稀释倍数为10⁶的培养基中测得平板上菌落数的平均值为225，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）               

(4)植物组织培养技术基本操作的正确顺序是                      。

①外植体消毒  ②制备MS培养基  ③接种  ④培养  ⑤栽培  ⑥移栽

    A．①→②→③→④→⑤→⑥   B．②→①→③→④→⑤→⑥

    C．②→①→③→④→⑥→⑤   D．①→②→③→④→⑥→⑤

(5)在植物组织培养过程中，往往需要使用植物激素启动细胞分裂，人为地控制细胞的                     和                    。

(6)通过电泳法分离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小以及                    。

(7)用含有蛋白酶的洗衣粉洗涤丝绸衣物和羊毛衣物是否合适?为什么?                                                                                 

(1)当糖源充足或缺少糖源时，醋酸菌分別能将                  物质最终转变成醋酸。

(2)为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验:

若在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培养的细菌起到                 的作用。若取土样4g,应加入          ml的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将10⁴-10⁷倍的稀释液分别吸取0.2mL加人到固体培养基上，在对应稀释倍数为10⁶的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为:219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为        (小数点后保留一位小数)。

(3)若为了获得更多青蒿素，需将青蒿离体的细胞或组织培养成愈伤组织。青蒿的细胞分裂、组织分化能力比菊花困难一些，需要借助外源激素才能更好的分裂和分化。若上述培养基用来进行青蒿细胞、组织的组织培养，还应加入的具体植物激素是                        。碳源可以用            代替。

(4) 胡萝卜素粗品用            法进行鉴定，鉴定过程中需用              作为对照。