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            • 1. 埃博拉病毒(EBO)是一种烈性的、泛嗜性的病毒,它首先破坏吞噬细胞,其次是肝、脾等细胞,进而导致血管通透性增加,出现严重的出血热现象.目前尚无针对该病毒的特效药或疫苗.

              (1)EBO感染者很难形成高浓度的抗体,因为它首先破坏吞噬细胞,阻断了 ______ 免疫的发生.
              (2)为了获得所需的B淋巴细胞,对小鼠必要的操作是 ______
              (3)过程②甲细胞与瘤细胞融合时,不同于植物细胞的诱导方法是利用 ______
              (4)为了筛选出特定的杂交瘤细胞,可以利用专一性抗体检测的方法,选择出呈 ______ 性的细胞.
              (5)将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或者 ______ 就可以提取大量的单克隆抗体.
              (6)通过此方法获得的单克隆抗体的主要优点有 ______ ______
              (7)单克隆抗体技术的基础是 ______ 技术,原理是 ______
            • 2.
              葡萄酒酵母(C1)具有良好的发酵性能,但分解苹果酸能力差,过多的苹果酸会使葡萄酒有酸涩感,解苹果酸裂殖酵母(Ml)具有极强的降解苹果酸能;但发酵性能极差.为了培育新型酵母菌菌种,科研人员采用了以下步骤进行育种.请分析回答:

              (1)步骤一:制备原生质体.培养Cl、Ml单倍体亲株,加入一定量的0.5%的蜗牛酶液,保温处理一段时间,用一定浓度的高渗缓冲液洗涤,以确保获得更多的原生质体.
              ①本实验中,蜗牛酶液的作用是 ______ .
              ②在无菌条件下,用 ______ (A:高渗缓冲液、B:低渗缓冲液、C:生理盐水)洗涤,以确保获得更多的原生质体.
              ③改变蜗牛酶液浓度进行多组实验,结果见图1,分别计算酶浓度为1和1.5时的形成率与再生率,相比较酶浓度为 ______ 时更适宜.
              (2)步骤二:诱导原生质体融合.取Cl、Ml原生质体悬浮液等量混合,离心去除上清液,加入一定量40%的 ______ 溶液,30℃保温20min,镜检并观察融合情况.
              (3)步骤三:融合子的鉴定.测定细胞体积及DNA含量,结果见表1,从中挑选出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是 ______ .
              (4)步骤四:融合子发酵性能的测定.测定融合子与亲株的降糖能力和降酸能力,图2和图3是对Z29和亲株的测定结果,据图分析可以得出的结论是 ______ 的降糖能力和降酸能力均较好,表明 ______ .
            • 3.
              如图表示细胞融合技术的一些过程.据图回答下列问题.

              (1)若A、B细胞为植物细胞,那么这样的细胞已经用酶催化降解脱掉了 ______ .这种酶可能是 ______ 酶,判断的依据是 ______ .由此生成的结构称为 ______ .
              (2)若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为淋巴细胞,那么D细胞称为 ______ 细胞,由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程,称为 ______ 过程.这种细胞既无限繁殖,又能产生 ______ .
            • 4. 如图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:

              (1)若A、B细胞为动物细胞,从A和B细胞到C细胞的过程中,常用 ______ 作为 ______ 来诱导融合.A、B融合为C的过程说明了细胞膜有 ______ 特性.
              (2)若A、B细胞为植物细胞,那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了 ______ .这种酶可能是 ______ 酶和 ______ 酶.由此生成的A和B细胞称为 ______ .A、B到C细胞的过程中,常用的物理方法是 ______ ;融合完成的标志是 ______ ;形成的D细胞还要应用 ______ 技术把D培养成植株.
              (3)若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为B淋巴细胞,那么D细胞称为 ______ 细胞.由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程,称为 ______ 过程.这种细胞既能无限繁殖,又能产生 ______
              (4)若该过程是制备单克隆抗体的过程,在A、B到C的过程中,所形成的C有 ______ 种,用来培养的D细胞应该是 ______ .从中选择出它的方法是 ______ 培养.
            • 5. 干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白,具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性.回答下列问题:
              (1)干扰素的作用机理是:干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体,激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白,其中有些蛋白可通过激活 ______ 使病毒的RNA水解;有些则可与 ______ (细胞器)结合,通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用.
              (2)利用基因工程生产干扰素的方法之一是:利用 ______ 酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起构建基因表达载体,采用 ______ 的方法导入牛的受精卵细胞中,经胚胎早期培养至 ______ 期,移植入母体内发育成熟,即可获得能产生干扰素的转基因牛.
              (3)利用细胞工程也能生产干扰素,其设计思路是:将相应的免疫细胞和瘤细胞利用电激、PEG、 ______ 等方法诱导融合,再利用 ______ 培养基筛选出杂交瘤细胞,经细胞培养可获得大量干扰素.由于干扰素在体外保存困难,可利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:预期蛋白质功能→ ______ →推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核甘酸序列.
            • 6. 图为细胞融合的简略过程,请据图回答:
              (1)A、B到C的过程中,动物细胞融合常用的诱导方法是 ______
              若该图是生产抗甲型流感病毒的单克隆抗体的制备过程. A为从小鼠体内获取的 ______ ,在获得此细胞之前,小鼠需注射 ______ ,图中B细胞是小鼠骨髓瘤细胞,符合要求的D细胞具有的特点是 ______
              (2)若通过植物组织培养技术把D培养成杂种植株,D个体 ______ (可育/不育).利用上图原理育种工作者还可以进行 ______ 育种.
              (3)若A、B分别是优良奶牛的精子和卵细胞进行体外受精,一般要把B培养到 ______ 期.若要通过A、B获得多个遗传物质相同的且能产奶的个体,实际操作中用到的技术有 ______ ______ (至少写二种).
            • 7. 自然界中的生殖细胞融合能产生有性后代,细胞工程中体细胞杂交技术被广泛应用于培育杂种植株和生产单克隆抗体等方面.请回答以下相关问题:
              (1)若a、b分别为动物的精子和卵细胞,则产生a、b的分裂方式是 ______
              (2)若a、b表示体细胞,两者融合完成的标志是 ______ ,由d细胞形成杂种植株的原理是 ______ ,其中使用了植物组织培养技术,该技术的中心环节是形成愈伤组织,然后诱导它再分化形成植株,再分化的原理是 ______ ,植物体细胞杂交的意义是该技术能克服 ______
              (3)生产单克隆抗体时一般不直接培养效应B细胞,主要原因是 ______ ,若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞器中出现的先后顺序是 ______
            • 8. 科研人员为了判定人体中某两个基因是否在同一条染色体上,做了人•鼠细胞融合实验.人、鼠融合细胞在细胞增殖过程中会随机地丢失人的染色体(人染色体数46条,鼠染色体数60条),选出保留要研究的人染色体的融合细胞,测定其是否出现待测基因的表现型(已知这些性状都是小鼠细胞所没有的),从而判断待测基因所属的染色体.请回答:
              (1)人、鼠细胞融合常用的生物融合诱导剂是 ______ ,融合过程体现了细胞膜的 ______ 性.
              (2)如果仅考虑两两融合的细胞,融合体系中除含有入,鼠融合细胞外,可能还有 ______ ______
              (3)细胞融合后的增殖方式是 ______ ,一个人-鼠融合细胞,在不分裂染色体数目最多是 ______ 条.
              (4)有五个人一鼠融合细胞株A、B、C、D、E,分别测得甲、乙、丙、丁四种表现型,结果如表:
                保留的人染色体   测定的性状
               细胞株  3 甲  乙  丙  丁 
              + - - - + - +
              - + - + - + +
               D - - - - - - +
               E + + + + + + -
              注:+表示保留的染色体或具有某一性状,-表示没有
              实验表明:控制 ______ 两个性状的基因都在人的2号染色体上.
              (5)若想制备单克隆抗体,需要用已免疫的 ______ 细胞和骨髓瘤细胞融合.
            • 9. 科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠-人嵌合抗体,用于癌症治疗.如图表示形成鼠-人嵌合抗体的过程.请据图回答:
              (1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取 ______ ,在诱导剂的作用下与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞,此细胞的特点是 ______ ______ .与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用 ______ 诱导融合.
              (2)细胞融合是随机的过程,所以需要用 ______ 培养基筛选,目的是选择出杂交瘤细胞.对筛选出的细胞还需进行 ______ ______ ,经多次筛选,就可获得足够数量,能产生特定抗体的 ______
              (3)若在体外大规模培养该细胞,首先应保证被培养的细胞处于无菌无毒的环境中,为了防止细菌的污染,所用培养液应该添加一定量的 ______ ,此外还要 ______ ,防止细胞代谢产物对细胞有影响.在培养液中提供5%CO2目的是 ______
              (4)这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点是 ______ ,可大量制备.临床试验上借助单克隆抗体的 ______ 作用,将药物带到癌细胞所在位置.
              (5)科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠-人嵌合抗体基因,然后导入到鼠淋巴细胞中,改造抗体属于 ______ 工程的范畴.
            • 10. 由于人突变细胞中含胸苷激酶(TK)而缺乏HGPRT酶,小鼠正常细胞中含HGPRT酶而缺乏TK,两种细胞均不能在HAT培养基中生长,但可在普通培养基中生长.利用上述两类细胞融合获得杂种细胞,在杂种细胞传代过程中,鼠的染色体被保留下来,人的染色体随机丢失,以至最后只剩一条或几条人染色体(如下图,图中数字代表保留的人染色体编号).科研人员运用这一方法确定了胸苷激酶基因所在的染色体.分析回答:

              (1)人、鼠细胞融合的原理是 ______ .过程A常用化学诱导剂是 ______ ,与植物原生质体融合过程相比特有的诱导方法是 ______
              (2)动物细胞培养过程中,人工合成的培养基需要加入一定量的 ______ ,以满足细胞生长的需求.培养液中还要添加一定量的抗生素的目的是 ______ ,培养箱中充入5%的CO2气体的主要作用是 ______
              (3)过程B用HAT培养基进行培养,目的是筛选出 ______
              (4)为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中,人鼠融合细胞应在 ______ (填“HAT”或“普通”)培养基中传代培养.为检查杂种细胞中含有的人染色体数目和形态,最好选取 ______ (时期)的杂种细胞进行观察.
              (5)若将某次实验获得的各种人鼠杂种细胞分别在HAT培养基中培养,一段时间后,发现在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长,检查杂种细胞中保留的人染色体情况如表(表中“+”表示有相应染色体,“-”表示无相应染色体):
              杂种细胞 保留的人染色体
              2号 3号 5号 9号 12号 17号 21号
              A + + + + - + -
              B - + - - + + -
              C + - + - + + +
              根据表中信息,可推测人细胞中胸苷激酶基因位于 ______ 号染色体上.
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