39、研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_____（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建____________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是___________，细胞融合的原理是___________。

（3）将融合细胞在___________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取有克隆生长的细胞培养液中的__________（填“上清液”或“沉淀细胞”），应用_____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过____________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体____________的特点。

54、如图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。

（1）该方案能达到预期效果吗？________，原因是______________________________。

（2）在制备破伤风杆菌抗体过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有________________、________________的特性。

（3）在上图制备破伤风杆菌抗体的过程中，进行了两次筛选，其目的不同，②是通过筛选获得___________，④是通过筛选获得 ___________________________________。

（4）该技术利用的生物学原理有                                           。

（5）此过程中，常用的与植物细胞融合不同的诱导方法是___               _____。

（1）图中A过程是先给小鼠注射_________类物质，然后从小鼠的体内提取分离________细胞，该细胞能够产生_____________。

（2）B过程是细胞融合过程，依据的原理是_________________。该过程的进行需要灭活的__________或_____________的诱导。若仅考虑细胞两两结合，B过程得到的细胞有____种。

（3）杂交瘤细胞在体外培养时需用_________培养基，与植物组织培养不同的是，培养基中必须添加__________________成分。

研究表明,某种原癌基因表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为乳腺癌有效的生物治疗手段。如图为抗H蛋白单克隆抗体的制备及相关操作过程,请回答问题:

(1)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与甲培养皿中骨髓瘤细胞进行融合,则乙培养皿中融合细胞类型有　　 　　种,其融合的原理是　　　　　　　　。其中将H蛋白注射到小鼠体内时,在小鼠体内发生了　　　 　免疫过程。

(2)图中③过程,将融合细胞置于　　　 　培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到丙(多孔培养板)上培养,吸取生长有克隆细胞的培养孔中的上清液,应用　　　 　技术进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

(3)治疗乳腺癌时,可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体　　 　　　　　　　的特点。筛选得到的杂交瘤细胞,经过②过程(小鼠腹腔内培养)或④过程(体外培养)可以获取大量的单克隆抗体,由上述过程产生的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是　　　　　　　　　　　　。

(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因,该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体的技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路:　　　　　　　。

    （1）a过程为从小鼠的_______________中提取抗体；经b、c、d过程获得抗体相对于a过程获得抗体的优势是____________。

    （2）b过程一般从小鼠的________（器官）中分离免疫细胞，甲试管中的免疫细胞是_________。

    （3）乙管内的细胞为鼠瘤细胞，若甲管中只有4种细胞，且只考虑细胞的两两融合，可有_____种融合细胞。过程c需使用特定的选择培养基进行筛选，分离获得丙试管中细胞的特点是__________。

    （4）d过程是对丙试管中的细胞进行______________和______________，以获得足够数量的能够分泌抗CD3特异性抗体的细胞。

（5）将能分泌抗CD3抗体的杂交瘤细胞在体外培养，或注射到小鼠腹腔内，分别从______或小鼠的______中提供取可得到大量单克隆抗体。

（1）若A细胞是经抗原刺激的小鼠B淋巴细胞，则B细胞一般选用__________，C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是___________。

（2）在杂种细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________，其培养液与植物组织培养的培养基相比，特有的天然成分__________。

（3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，其具有的特点是____________________，还需进行克隆化培养和__________，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到__________内进行增殖。

（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断埃博拉璃毒的感染者，这体现了单克隆抗体____________________的特性。

（1）利用乳腺反应器生产抗体

将黑色素瘤抗体基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，构建            ，通过                 方法导人山羊受精卵中，在体外培养到           时期，进行胚胎移植，获得转基因山羊，待其成熟后，从乳汁中提取抗体。

（2）利用杂交瘤细胞生产抗体

 ①下列是该技术的部分图解，请把代表各步骤的字母填写在流程示意图中。

②该方法生产的黑色素瘤单克隆抗体的优点是                             。

(1)______________________________________________技术是单克隆抗体技术的基础。

(2)从图中可以看出HAT培养基具有_____________________作用。

(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是_________________________。

(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的___________特点，又具备淋巴细胞分泌的________特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次_____，才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或在小老鼠腹腔内增殖，从细胞培养液中或从小老鼠腹腔的腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。

(5)浆细胞是由动物体          中的          细胞分化、发育而来。

(1)图示技术名称为________________，该技术的基础是__________________技术。

(2)操作所用的成纤维细胞应在________代以内；诱导融合运用了__________________原理。

(3)培养时pH一般为______________；在操作中加入乌本苷的目的是____________________。

(4)下表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“+”表示存在，“-”表示不存在)，这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码________酶的基因位于染色体2上。

（1）若A．B细胞为动物细胞，从A．B细胞到C细胞的过程中，常用灭活的病毒作为诱导剂来诱导细胞融合。A．B融合为C的过程说明了细胞膜具有                   特性。

（2）若A．B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶解法脱掉了      。这种酶可能是        酶，由此生成的A和B细胞称为               。

（3）若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为效应B淋巴细胞，那么D细胞称为                细胞,这种细胞既能                 ，又能产生                        。