下图为单克隆抗体制备流程示意图。

(1)单克隆抗体制备技术的基础是 ____________________________。

(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是______________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的____________________ ，以保证生命活动的正常进行。    

(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是_______________ 。

(4)若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是____________________________________________________。

治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：

（1）过程①采用的是细胞工程中的__________技术，过程②采用的是胚胎工程中的_____技术。

（4）胚胎干细胞可以来自于囊胚中的___________。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体_____（填“A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。

已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但有些淋巴细胞不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答：

（1）生产单克隆抗体时，不直接利用浆细胞，主要原因是_______________ 。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是_____________________。

（3）②过程为_______培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO₂的目的是__________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养，也可注射到小鼠_______内培养.体内培养与体外培养相比,其优点是_____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需在③过程向培养液中加入________________，理由是杂交瘤细胞可利用____________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。

女性怀孕后会分泌一种糖蛋白——绒毛膜促性腺激素(HCG），尿液中会检出HCG的存在。用抗HCG单克隆抗体制备的试纸可以测试女性是否怀孕。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：

（1）制备单克隆抗体利用的生物学技术有______________和_____________。

（2）促进动物细胞融合得到乙，常采用的方法有_________、________（答2个）。

（3）用特定的选择培养基对乙筛选，得到的细胞丙的特点是_____________。

（4）对丙检测筛选得到丁，采用的方法是__________。生产的单克隆抗体可以与__________特异性结合，从而诊断早孕。

（5）将验孕试纸标有MAX标志线的一端插入待测尿液中（尿液不能没过该线），片刻后取出平放，若尿液中含有HCG，会随尿液向右扩散，与包埋在标志线右侧区域的被显色剂标记的抗HCG抗体1发生特异性结合，形成的复合体继续随尿液向右扩散至检测线处，又可以与固定在该区域的抗体2结合形成新的复合体，并不断积累，从而在此处显示出颜色。对照线区域固定着另外一种抗体3，可以捕获被显色剂标记的抗体1。因而当尿液继续扩散到对照线时，也会显示出颜色。

据此判断：①若检测线和对照线均显示颜色，表示_________；

②若仅有对照线显示颜色，表示_______________；

③若检测线和对照线均不显示颜色，表示___________。

Ⅱ、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。

(1)该方案能达到预期效果吗？________。原因是__________________。

(2)图中过程②中使用的特有诱导剂是______________。如果能成功获得理想的杂交瘤细胞，该细胞的特点是  ________________________（答两点）。

(3)在制备破伤风杆菌抗体的过程中，进行了两次筛选，其目的不同，②是通过筛选获得__________，④是通过筛选获得___________________。

(1)给小鼠注射抗原的目的是__________________________________________   _______  。

(2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有__________________的特性。

(3)由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了_______  _______和_________________的动物细胞工程技术手段。

(4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是还含有__________________________。

(5)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用___________ ___处理离体组织细胞使之分散。

(6)图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是筛选出____________________________，步骤⑤⑥的目的是筛选出__________________

(7)请根据以下信息，设计一方法(不考虑机械方法)，从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促融，获得杂种细胞。

方法：______________________________________________________________________。

原理：____________________________________________________________________  _____。

下图表示某科学家利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的相关过程，据图回答下列问题：

（1）步骤①②利用的技术名称分别是                 、                     。图中造血干细胞中的遗传物质至少有         个来源。

（2）若利用PCR技术扩增目的基因并完成图示小鼠的基因治疗，涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和                  等。

（3）下图所示的一个质粒分子经EcoRⅠ切割前后，分别含有      、          个游离的磷酸基团。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，故利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取       作为引物。一个目的基因通过PCR技术扩增第n次时，需要        个引物。

（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发       色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否转录，可以采用                        的技术。

随着妊娠年龄的增加，21一三体的发病风险在不断增加．需要进行产前诊断来预防患病孩子的产生。常用的方法有：

  (1)唐氏筛查：抽取孕妇血液化验，检测血清中的甲型胎儿蛋白、绒毛膜促性腺激素等指标。检测这些物质可用__________技术，以细胞工程技术生产的、纯度高的_____________为试剂进行检测，筛查出的高危孕妇还需要进一步检查鉴定。

  (2)羊水检查：胎儿的某些细胞会脱落在羊水中，通过羊水穿刺，可以得到胎儿的细胞。将这些细胞通过___________技术以扩大细胞的数量，选择______的细胞进行染色体核型分析，了解胎儿细胞染色体的结构和___________是否正常。

  (3)无创基因检测：在孕妇的血液中存在胎儿游离DNA片段，可以对21号染色体上的特有基因DSCR₃和非21号染色体上的基因GAPDH(做参照)进行实时荧光定量PCR扩增，以测定DSCR₃基因和GAPDH基因的含量，计算2种基因剂量的比值。如：

  要利用胎儿游离的DNA片段扩增出相应的基因，关键是_________的设计。从上述表格看，正常人与21-三体患者的比值有差异，其主要原因是____________利用该技术筛查21-三体的胎儿是否可靠，请说明理由：_____________。