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            • 1.
              请回答与动物细胞培养基胚胎工程有关的问题:
              (1)欲获得牛的单个体细胞,需用 ______ 处理动物组织,在体外培养时,通常需在培养液中添加 ______ 等天然成分.
              (2)获取的卵子需培养到 ______ 时期才能用于核移植,通过核移植获得的动物称为 ______ .
              (3)在胚胎分割技术中,需将牛囊胚的 ______ 均分,可利用囊胚的 ______ 细胞进行性别鉴定.
              (4)ES细胞在 ______ 上或含有抑制因子的培养基上培养时,不会发生分化;可用ES细胞分化出人造器官用于器官移植,优点是 ______ .
            • 2.
              科学家通过转人四种基因,可使体细胞形成诱导性多能干细胞(iPS细胞),iPS细胞具有胚胎干细胞的类似功能,但并不能发育成胚胎.我国科学家利用iPS细胞在世界上第一次获得完全由iPS细胞制备的活体小鼠--“小小”(流程见图).

              (1)过程①从亲代鼠体内获得皮肤细胞后,对其进行的初次培养称为 ______ ,科学家向经培养的细胞导入四种基因(过程②),使其形成诱导性多能干细胞(iPS细胞).但基因导人受体细胞没有采用显微注射的方法,你认为最可能采用的方法是用 ______ 引入.
              (2)iPS细胞在体外已成功地被分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等,这说明iPS细胞在功能上具有 ______ .科学家设想在不久的将来人们可通过向人体移植iPS细胞使功能出现异常、损伤或退化的器官得以修复,它的优点是可避免器官移植后的 ______ 问题.
              (3)我国科学家通过将iPS细胞注人四倍体囊胚再经④过程 ______ 技术移入代孕母鼠的子宫内继续发育,最终获得克隆鼠及其后代.诱导二倍体细胞融合形成四倍体细胞的方法有 ______ 等.移入的胚胎能够在受体子宫内存活发育是因为供体胚胎可与受体子宫建立 ______ 联系.
            • 3.
              华蟾素注射液是将蟾蜍的全皮阴干后,提炼而成的中药复方制剂,是我国经典抗肿瘤药物.研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理,进行了一系列实验.请根据题中信息回答下列问题.

              Ⅰ.肝癌HepG-2细胞的培养:
              (1)培养肝癌HepG-2细胞时,在培养基中加入适量的 ______ 以补充合成培养基中缺乏的物质,为防止培养过程发生污染要加入 ______ .此外,每48h更换1次培养液,目的是 ______ .同时还要提供适宜的温度、 ______ 、氧气和二氧化碳等环境条件.
              Ⅱ.探究华蟾素药效作用机理的实验:
              (2)用不同浓度的华蟾素注射液分别处理HepG-2细胞12h、24h和48h,测定华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的影响,结果如下图.图1由图甲可知,华蟾素能有效地 ______ 肝癌HepG-2细胞增殖,且与 ______ 呈正相关.图乙的结果进一步表明,华蟾素对肝癌HepG-2细胞增殖的影响体现在 ______ .
              (3)DNA拓扑异构酶Ⅱ(简称TopoⅡ)为真核生物所必需,在DNA复制、转录、重组及形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩等方面发挥重要作用,TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞.华蟾素注射液处理HepG-2细胞48h后,采用RT-PCR技术检测TopoⅡ基因的表达情况,结果如图丙.
              ①RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应.其主要原理是:提取HepG-2细胞中的总RNA,以一段 ______ 作为引物,在 ______ 酶的作用下合成cDNA,再以cDNA为模板进行 ______ .
              ②由图丙可知,华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是 ______ .
            • 4.
              我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗,其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质(S蛋白),对应的基因为s基因.请回答:
              (1)在构建重组DNA分子时,要用限制性核酸内切酶处理 ______ ,并用 ______ 酶使两者结合.将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞,经筛选得到工程细胞.
              (2)在细胞培养过程中,工程细胞在生长过程中有 ______ 现象,需要定期使用 ______ 酶处理,以便于分瓶培养.
              (3)为提髙工程细胞培养的成功率,下列措施中不需采用的是 ______ .
              A.取单个细胞进行培养   B.加入胰岛素
              C.二氧化碳培养箱          D.加入动物血清
              (4)由于哺乳动物细胞培养较难,成本较高,近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”,进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品.在这种技术中,作为重组DNA分子受体细胞的一般是 ______ .
            • 5.
              下列实验处理可达到目的是(  )
              A.用秋水仙素处理获得无子番茄
              B.用钙离子处理获得感受态大肠杆菌
              C.用聚乙二醇处理诱导细胞增殖
              D.用胃蛋白酶处理防止细胞贴壁生长
            • 6.
              欲研究药物乙对海拉细胞增殖的抑制作用,请根据以下提供的材料与用具,以海拉细胞的细胞数变化为测定指标,完善实验分组设计和实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论. 材料与用具:海拉细胞悬液,药物甲溶液(对细胞增殖有影响),药物乙溶液,培养液、培养瓶,血细胞计数板,显微镜等.
              (要求与说明:细胞计数的具体操作过程不做要求,不考虑加入溶液对体积的影响,实验条件适宜) 回答下列问题:
              (1)实验分组设计:
              A 组:海拉细胞悬液+培养液 B 组:海拉细胞悬液+培养液+药物甲溶液
              C 组:海拉细胞悬液+培养液+药物甲溶液,培养一段时间后,加入 ______ .
              (2)完善实验思路: ______ .
              (3)预测实验结果(以坐标曲线图形表示实验结果,并标出加入药物的时间):
              ______ .
              (4)分析与讨论:
              药物甲的作用是 ______ .
            • 7.
              金黄色葡萄球菌可引起皮肤伤口感染、败血症等疾病.有研究发现机体自身可产生免疫活性物质IL-33抵御金黄色葡萄球菌感染,科研人员对IL-33作用机制进行了研究.
              (1)皮肤感染金黄色葡萄球菌后,皮肤角质形成细胞分泌IL-33抵御感染属于 ______ 免疫.
              (2)科研人员用金黄色葡萄球菌感染小鼠,观察小鼠背部皮肤溃烂情况和皮肤角质形成细胞中IL-33的表达情况,结果如图1.

              由图可知,感染后第 ______ 天皮肤溃烂面积最大;皮肤溃烂面积变化与IL-33 表达量变化趋势 ______ .
              (3)已有研究证实,角质形成细胞通过表达REG3A抵御病菌.为了检测REG3A的免疫功能,科研人员将等量的金黄色葡萄球菌分别与不同浓度的REG3A混合,采用 ______ 法,统计3小时后金黄色葡萄球菌活菌的数量,结果如图2.
              结果表明随着浓度的增加,REG3A抑菌效果 ______ .
              (4)科研人员为了研究REG3A和IL-33的关系,利用 ______ 技术培养角质形成细胞并检测细胞中REG3A及IL-33表达量,结果如图3.
              综合上述结果,推测小鼠机体抵御金黄色葡萄球菌感染的调控机制如图4,请填写相关内容.
              ① ______ ② ______ ③ ______ ④ ______ .
            • 8.
              下列关于动物细胞培养的叙述正确的是(  )
              A.动物细胞培养过程中往往使用液体培养基
              B.动物细胞培养的目的是为了培养动物个体
              C.在培养过程中通常要通入5%的CO2刺激细胞呼吸
              D.动物细胞培养过程中可用胃蛋白酶将动物组织分散成单个细胞
            • 9.
              下列各项中属于克隆技术是(  )
              A.把鲤鱼胚胎细胞的细胞核移到去核鲫鱼成熟卵中
              B.体外培养基底层干细胞来培植皮肤用于植皮手术
              C.将小鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞结合成杂交瘤细胞
              D.将人工授精的受精卵体外培养形成胚胎
            • 10. 为治疗糖尿病,研究人员提出了如图1所示的方法.

              (1)一般选用的图中①都是______的供体细胞.
              (2)核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞.进行相关显微操作时,一般用微型吸管一并吸出______.
              (3)细胞在体外培养时,除培养液提供必需的营养条件外,还需要有______.如图所获的胚胎干细胞可由______中分离出来,在功能上具有______.
              (4)利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是______.将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞并维持稳定和表达的过程,称为______.
              (5)“定向诱导”的目的是使重组细胞B发生______,从而形成功能专一的胰岛类似细胞.
              (6)设计检测胰岛类似细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能的实验:
              ①研究人员分别控制甲、乙两组培养液中______的浓度.
              ②将胰岛类似细胞先后放在甲、乙两组培养液中,保温相同时间后检测胰岛素的分泌量.
              ③若诱导成功,则如图2所示图甲组应为______情况下所测胰岛素分泌量,理由是______.
              (7)该治疗糖尿病的方法与相比异体移植,突出的优点是______.
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